1963

4. Analyse yon biologischem Material

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nicotins~ure u. a. getrenn~ und colorimetrisch oder dureh Einbau yon 14C radioisotopisch bestimmt werden. Als Ionenaust~uscher dient Dowex l-X8 (100 bis 200 mesh), das mit S~ure, Gauge nnd Brenztraubens~ure vorbehandelt werden muG. EiweiBfreie LSsungen wie Urin kSnnen direkt uuf die S~nle gegeben werden. Blutplasma muB d~gegen zuvor mit 30~ Trichloressigs~ure enteiweiBt werden. 2 ml des so gewonnenenZentrifug~tes geniigen flit einen Durchlauf mit Nachwaschen yon Wasser, so dab 50 ml Eluat aufgefangen werden. Bei Markierung mit 14C wird die Bestimmung papierchromatographisch durehgefiihrt. Zur co]orimetrisehen Bestimmnng wird das acetylier~e Isoniaeid in Nieotins~ure mit 2 ml Salzs~ure im Autoklaven hydrolysiert. Der Trockenriickstand bildet mit Chloramin T und Kaliumcyanid in einem Barbit~lpuffer einen Farbkomplex der bei 600 nm gemessen wird. Das oftmals g!eichzeitig verordnete PAS stSrt die Reaktion nicht. 1 AnMyt. Chemistry 33, 1755--1757 (1961). Dept. Pharmac., Univ. Chicago, Ill. (USA). B. R o s s ~ A ~

~oer Beobachtungen bei der ehemisehen Bestimmungvon Desoxyribonueleinsiiure (DNS) in tierisehen Geweben berichten S. LOVTRVr und K. RoosL Verff. benutzen die yon K. Bv~To~ 2 modifizierte Dische-Reaktion mit Diphenylamin. Fehler, die dadurch entstehen, dal~ bei zu kurzer Extraktion mit Perchlors~ure nicht die gesamte DNS erfa[~t wird und bei zu langer Einwirkung der S~iure die Extinktion abnimmt, beseitigen Verff. auf Grund ihrer kinetischen Studien durch Berechnung nach der Gleiehung: log [(At/A~) -- 1] = log [(Ao/A~) -- 1] --/~. t. D~rin bedeutet A die Extinktion, die Indices o die Zeit 0 und ~ die Zeit, zu der die niedrigste Extil~ktion erreicht ist. Der Fehler ist kleiner ~ls 50/0, die Werte stimmen mit denen biologischer Methoden geniigend gu~ iiberein. 1 ~Bioehim. biophysica Aet~ (Amsterdam) 53, 1--10 (1961). Dept. Histology, Univ. G6teborg (Schweden). -- 2 Biochemic. J. 62, 315 (1956). E. Mi~LL~, Wiirzburg (~ber die Bestimmung versehiedener Desoxyribosylkomponenten berichten L. D. SASLAWund V. S. W~t~AVDEKA~~. Desoxyribose, Desoxyribose-5-phosphat, PurindesoxyribonucIeoside und Purindesoxyribonucleotids werden nach einer friiher ausgearbeiteten Methods 2 analysiert. Diese beruht darauf, dab Nucleoside bei hydrolytischer Sp~ltnng bei p~ 2 und Oxydation mit Perjodat bei Zimmertemperatur Malonaldehyd abspalten, w~hrend Nucleotide nur bei Erw~rmnng auf 70~ oxydlert werden. Der Malonaldehyd kann colorimetrisch mit Thioburbitursgure bestimmt ~erden. Arch. Biochem. Biophysics 90, 239--244 (1960). Biochem. Branch, Armed Forces Inst. of Pathol., Washington, D. C. (USA). -- e WA~AVDEXA~,V. S., u. L. D. SASLAW:Biochim. biophysic~ Act~ (Amsterdam) 24, 439 (1957); vgl. diese Z. 165, 232 (1959). U~s~ BAv~t~ber die Bestimmung der Nueleinsiiuren in Saeeharomyees italieus (CasteUi), die mtt Kohlenoxid, Kaliumeyanid oder ~atriumazid behandelt wurden beriehten A. J ~ : r , A. Sz]~I)~]~Yund E. VI~ ~. Es wird festgestellt, d~fi 1. die Gesam~menge der ~qucleins~uren bei CO-Behandlung ansteig~, m~ter Einwh'kung yon KCN konst~nt bleibt und bei Azidbehandhmg absinkt, 2. die ~enge DNA bei CO-Einwirkung um das 18--19fache, bei KCN-Zugabe um das 10fache ansteigt, 3. die Menge der Phosphoproteide dutch Azid-Eiawirkung am 650/0 verringert wird, 4. die Menge l~ibonucleias~uren bei CO-Einwirkung um 330/0 erhbht, bei Azidbehandlung um 60~ verringert wird, 5. die Menge der phosphorhaltigen Zwischenprodukte durch CO-Behandhng um 35o/0, durch KCN um 340/0 und durch Azid um 73~ abnimmt, 6. die Aufnahme yon Phosphor aus Rein Kul~urmedium dutch C0-Einwirkuag auf