Z. Anal. Chem. 252, 331 (1970) 9 by Springer-Verlag 1970
331
Gas-chromatographische Bestimmung des DNS-Gehahes biologischen Materials fiber den Thymingehah* F, D. GAUCHEL, K. BnY~MA~N und R. K. ZAHN Institut fiir anorganische und Kernchemie, UniversitS~t Mainz
Gas-Chromatographic Determination o/the DNA Content o/Biological Material by way o/the Thymine Content Uber wesentliche Verbesserungen eines Verfahrens zur Thyminbestimmung wird beriehtet. Bei diesem wird die Einwaage ( 1 - - 1 0 m g ) mit Ameisens/~ure hydrolysiert und Thymin mit Aceton extrahiert. Der Trockenrfickstand des Acetonextraktes wird bei 130 ~C im Vakuum sublimiert und das Sublimat dfinnschichtehromatographisch aufgetrennt. An der Stelle des l~f-Wertes des Thymins wird dieses eluiert und nach Sflylierung gas-chromatographisch bestimmt. Die Ausbeute des Verfahrens wird durch 14C-markiertes Thymin geprfift. Die Empfindlichkeit der Methode betr~gt 0,1 ~tg Thymin. Die Standardabweichung der Bestimmung yon 10 ~zg Thymin betr/~gt 15~ . * Ausffihrliche Ver6ffentlichung erfolgt in Kiirze in dieser Zeitschrift.
Die Verbesserungen, die eine Steigerung der Empfindlichkeit um eine Zehnerpotenz erm6glichen, ergeben sich aus einer sorgf/s Untersuchung der analytischen Parameter der einzelnen Trennschritte, fiber die berichtet wird. Die Anwendung des Verfahrens zur Analyse des DNS-Gehaltes unterschiedlichster Gewebe (Itumangewebe, Here, Seeigeleier, SchwKmme) wird gezeigt. Die Ubereinstimmung der Ergebnisse mit den aus anderen unabh~ngigen Verfahren erhaltenen Werten wird nachgewiesen. Prof. Dr. K. Beyermann Institut ffir Anorganische und Kernchemie der Universit~t D-6500 Mainz, Joachim Becher-Weg
Z. Anal. Chem. 252, 331--336 (1970) 9 by Springer-Verlag 1970
Probleme der Analytik von Pyridin-Nucleotid-Coenzymen I. Mitteilung. ~-Nicotinamid-adenin-dinucleotid M. GRASSL, M. NELBOECK-HOCHSTETTERund K. BEAUCAMP Boehringer 1Vfannheim G.m.b.H., Biochemica Werk Tutzing, Forschungszentrum Eingegangen am 6. Juni 1970
Problems o] the Analysis o] Pyridine-Nucleotide Coenzymes. I. fi-Nicotinamide-adenine-dinucleotide. The quality of pyridine-nucleotide preparations is very difficult to evaluate by the common analytical methods like enzymatic procedures and measurements of the optical density because of the relatively high error of these methods. I t is especially difficult to obtain exact results for the content of UV-absorbing compounds. A new procedure is described by which these components can be separated chromatographically and estimated down to a concentration of 0.1 ~ The results with NAD arc discussed in detail.
Zusammen/assung. Die Qualit/~tsbestimmung yon Pyridin-Nucleotid-Coenzympr~tparaten mit den /iblichen Analyscnmethoden, wie cnzymatische Bestimmung und Extinktionsmessungen, ist aufgrund groBen Fehlerbreite dieser Methoden schwierig. Ein spezielles Problem stellt die quantitative UV-absorbierender Begleitstoffe dar. Ein neu entwickeltes Chromatographie-Verfahren erlaubt, unreinigungen abzutrennen und bis zu einem Gehalt yon 0,1~ zu bestimmen. Am Beispiel yon die Methode n/ther erl/~utert.
der relativ Erfassung diese VerNAD wird