5g. Jg., He/t 9, 1967
Kurze OriginalmitteiIungen
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der A g a r - G e l - D i f f u s i o n s p r g z i p i t a t i o n n a c h OUCHTERLONY [4] geprt~ft. N a c h d e m in der A g a r - G e l - D i f f u s i o n keine pr~izipit i e r e n d e n A n t i k 6 r p e r n a c h w e i s b a r waren, w u r d e n die gleiehen Seren m i t diesen A n t i g e n e n ( E x t r a k t a u s s o l i d e m P l a s m o c y t o m sowie Zellen u n d U b e r s t a n d a u s P l a s m o c y t e n - A s c i t e s ) in V e r d f l n n u n g e n , die keine a n t i k o m p l e m e n t i i r e A k t i v i t i i t m e h r aufwiesen, a u f d a s V o r h a n d e n s e i n v o n k o m p l e m e n t b i n d e n d e n A n t i k 6 r p e r n in d e r K~iltebindung n n t e r s u c h t . Die geprt~ften Seren e n t h i e l t e n in der t ( o m p l e m e n t f i x a t i o n n a c h weisbare A n t i k 6 r p e r o h n e I n d i v i d u a l s p e z i f i t ~ t sowohl g e g e n E x t r a k t a u s s o l i d e m P l a s m o c y t o m als a u c h g e g e n Zellen n n d U b e r s t a n d des P l a s m o c y t o m - A s c i t e s . H a m s t e r , die ein solides P l a s m o c y t o m t r a g e n , bilden zirkulierende A n t i k 6 r p e r g e g e n diesen T u m o r . Die biologische B e d e u t u n g dieser A n t i k 6 r p e r bleibt G e g e n s t a n d weiterer U n t e r s u c h u n g e n . Z u r H e r s t e l l u n g y o n I m m n n s e r e n bet l ~ a n i n c h e n w u r d e n solides P l a s m o e y t o m n n d P l a s m o c y t o m - A s e i t e s als A n t i g e n v e r w e n d e t . Die g e w o n n e n e n I m m u n s e r e n zeigten in d e r K o m p l e m e n t b i n d u n g s r e a k t i o n u n d in der Gel-Diffusion positive Reaktionen mit Extrakt aus solidem Plasmocytom und auch m i t Zellen u n d O b e r s t a n d des P l a s m o c y t o m - A s c i t e s . N a c h u n s p e z i f i s c h e r A b s o r p t i o n dieser A n t i s e r e n m i t l y o p h i I i s i e r t e m H a m s t e r - N o r m a l - P l a s m a s i n k e n die T i t e r u m 4 - - 5 S t u f e n . Die Vollst~indigkeit der A b s o r p t i o n w u r d e d u r c h d a s A u s bleiben einer R e a k t i o n dieser Seren m i t d e m A b s o r b e n d e n n a c h g e w i e s e n ; s o m i t sind die e r h a l t e n e n T i t e r als spezifisch anzusehen. I n der Gel-Diffusion bleibt die P r ~ z i p i t a t i o n n a c h A b s o r p t i o n der A n t i s e r e n ans. Dieses E r g e b n i s in der Gel-Diffusion ber n h t e n t w e d e r a u f ihrer g e r i n g e r e n E m p f i n d l i c h k e i t gegeniiber d e r K o m p l e m e n t b i n d u n g s r e a k t i o n , oder a u f d e m F e h l e n spezifischer, pr/izipitierender A n t i k 6 r p e r . Eingegangen am I9. J a n u a r I967 [1] EMMINGER, A., J. EICKE, U. MOHR U. H. WRBA: Z. Krebsforsch. 67, 172 (1965). - - [9] GARCIA, It., C. BARONI U. H. RAPPAPORT: J. Natl. Cancer Inst. 27, 1328 (1961). - - [8] MOHR, U., u. W. DoxTENWlLL: Z. Krebsforseh. 66, 29 ( 1 9 6 4 ) . - E4] OUCHTERLO~'Y,0.: Acta PathoI. Microbiol. Stand. 2s, 186 (t948). - - Ig] WIESER, 0., A. E~.~INOER U. U. MOHR: Naturwissenschaften S3, 202 (1966).
Entwicklung der Kinocilien im Tubenepithel des Menschen
Fig. I a u. b. KinocilienbiIdung bet 70 m m langem Embryo. Rudiment~ire Einzelcilien an der Zelloberfl~che. F h = F l i m m e r h a a r . B K = BasalkSrperchen. C = CentrioI. My = Mikrovi]li. Bet a Centriol im Quersehnitt. Vergr. 37000fach. Bet b Centriol im L~ingssehnitt. (28000 x ) Fig. 1 c--e. Kinoeilienbildung bei 28 cm langem Feten. e: Epithelzelle m i t intraeellul/irer Flimmerblase. Vergr. 12000fach. - d: Ausschnitt einer aufgebrochenen Flimmerblase mit ausdifferenzierten Kinoeilien. Vergr. 17600faeh. - - e: Querschnitt einer Kinocilie. Aufbau aus 9 peripheren Doppe~ilamenten und zwei zentralen Filamenten. (66000 • )
L. O V E R B E C K U n i v e r s i t ~ t s - F r a u e n k l i n i k Kiel Elektronenmikroskopisehe Untersuchungen am menschlichen T u b e n e p i t h e I w~ihrend der E m b r y o n a l - u n d F e t a l z e i t ergaben, d a b die K i n o c i l i e n b i l d u n g n a c h zwei E n t w i c k l u n g s m o d i verl~uft. D e r erste M o d u s (Fig. t a u n d b) s e t z t i m 3. E m b r y o n a l m o n a t ein. U n t e r der Zelloberfl~che e n t s t e h t ein t3asalk6rperchen, y o n d e m a u s sieh d u t c h fingerfSrmige Vorw61bung der Z e l l m e m b r a n die eigentliche Cilie f o r m i e r t (Fig. t a). D a s einzelne F l i m m e r h a a r l~iBt b a l d d e n A u f b a n a u s l o n g i t u d i n a l o r i e n t i e r t e n M i k r o f i l a m e n t e n e r k e n n e n (Fig. I b). Gelegentlich s t r a h l e n feine Wnrzelfibrillen z u r V e r a n k e r u n g ins C y t o p l a s m a . Die K i n o c i l i e n b i l d u n g erfolgt in d e r N~ihe des G o l g i - A p p a r a t e s u n d der energieliefernden M i t o c h o n d r i e n ; gleichzeitig erweit e r t sieh d a s e n d o p l a s m a t i s c h e IRetikulum. S e r i e n s c h n i t t e ergaben, d a b die B a s a l k 6 r p e r c h e n s t r u k t u r e n u n d d a m i t die Kinocilien w a h r s c h e i n l i c h d u r c h 1Reduplikation des Centriols e n t s t a n d e n sind. Die E n t w i c k l u n g beschr~inkt sich bet d i e s e m M o d u s ausschlieBIich a n f die A u s b i l d u n g y o n Einzelcilien a n der Zelloberfliiche, die w ~ h r e n d der g a n z e n i n t r a u t e r i n e n E n t w i c k l u n g anh~ilt. Die A u s d i f f e r e n z i e r u n g bleibt rudiment~ir. E i n zweiter, a n d e r s a r t i g e r E n t w i c k l u n g s m o d u s (Fig. t c - - e ) s e t z t i m 5- F e t a l m o n a t ein. I n t r a c y t o p l a s m a t i s e h k o m m t es i m p a r a - oder supranucle~iren Bereich einiger E p i t h e l z e l l e n zu einer oft l e b h a f t e n N e u b i l d u n g y o n B a s a l k 6 r p e r c h e n , die o f f e n b a r ebenfalls d u r c h C e n t r i o l e n v e r m e h r u n g e n t s t a n d e n sind. A u s d e n B a s a l k S r p e r c h e n s t r u k t u r e n h e r a u s f o r m i e r e n u n d differenzieren sich Flimmerb~irchen. U n t e r z e n t r a l e r Vaeuolisierung e n t s t e h e n intracelluliire F l i m m e r b l a s e n m i t w a n d st~indiger K i n o c i l i e n a u s k l e i d u n g (Fig. 1 c). N a c h \ V a n d e r u n g der F l i m m e r b l a s e folgt i m Bereieh der Zelloberfl~iche i h r A u f b r u c h u n d ihre E n t i a l t u n g , w o d u r c h der urspriinglich i n t r a c y t o p l a s m a t i s c h e F l i m m e r s a u m in d e n L u m e n s a u m der T u b e e i n b e z o g e n wird u n d d a m i t d e n d i c h t e n F l i m m e r b e s a t z a n der
Oberfl~iche der F l i m m e r e p i t h e l z e l l e n bildet. Die weitere A n a lyse ergibt, d a b der C i l i a r a p p a r a t s c h o n i m 5. M o n a t d e r i n t r a u t e r i n e n E n t w i c k l u n g eine h o h e s t r u k t u r e l l e Reife h a t . Die Kinocilien iassen d e n i m Bereich der g e s a m t e n Biologie i i b e r e i n s t i m m e n d e n G r n n d a u f b a u a u s F l i m m e r h a a r , Basalk S r p e r c h e n u n d \Vurzelfibrillen (Fig. I d) sowie die s t r u k t u relle A n o r d n u n g a u s 9 p e r i p h e r e n D o p p e l f i l a m e n t e n n n d zwei z e n t r a l e n F i l a m e n t e n (Fig. re) e r k e n n e n . Die gleichartige r ~ u m l i c h e A n o r d n u n g der F i l a m e n t e b e n a c h b a r t e r F l i m m e r h / i r c h e n l~Bt eine g e m e i n s a m e S c h l a g r i e h t n n g des g e s a m t e n C i l i a r a p p a r a t e s einer Zelle v e r m u t e n , w o r a u s sich eine h o h e f u n k t i o n e l l e Reife ableiten l~iI3t. Eingegangen aln 22. Dezember 1966
Topik H. RABES
der DNS-Synthese und
nach
Teilhepatektomie
H. V. TUCZEK
P a t h o l o g i s c h e s I n s t i t u t der Universit~it l~'Iiinchen U n t e r s u c h u n g e n z n r T o p i k der M i t o s e n [1] u n d der D N S s y n t h e t i s i e r e n d e n Zellen [9] n a c h partieller H e p a t e k t o m i e zeigten bet einer U n t e r t e i l u n g d e r Leberiobuli in azinoperiphere, intermedi~ire u n d zentrale Zone, d a b die Proliferation der L e b e r p a r e n c h y m z e l l e n in der a z i n o p e r i p h e r e n Zone beg i n n t u n d i m L a u f e des R e g e n e r a t i o n s v o r g a n g e s n a c h m e d i a l u n d z e n t r a l fortsehreitet. Bet einer m o r p h o l o g i s c h e n A n a l y s e w e s e n t l i c h kleinerer U n t e r e i n h e i t e n der L e b e r l / i p p c h e n w u r d e eine S o n d e r s t e l l u n g der L e b e r p a r e n c h y m z e l l e n in u n m i t t e l b a r e r N a c h b a r s c h a f t der G l i s s o n s c h e n Felder b e o b a c h t e t . 2 0 h n a c h Z w e i d r i t t e l r e s e k t i o n der L e b e r erhielten 2 5 0 g s e h w e r e S p r a g u e - D a w l e y - R a t t e n 200 ~zC T h y m i d i n - 6 - T (spez. A k t . 1,9 C/raM) in 1,0 m l Salzl6sung i . p . Die L e b e r w u r d e 60 m i n spiiter e n t n o m m e n u n d in fiblicher A r t a n t o r a d i o g r a p h i s c h b e a r b e i t e t ( E m u l s i o n K 2, Ilford). Mit e i n e m O k u l a r -
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Kurze Originalmitteilungen
Ztthlraster w u r d e n in die H a e m a l a u n - g e f i i r b t e n A u t o r a d i o g r a m m e der L e b e r bet m i t t l e r e r M i k r o s k o p v e r g r 6 B e r u n g Quad r a t e projiziert, d u r c h die die Zone z w i s c h e n Vena centralis (V. c.) u n d G l i s s o n s c h e m Feld (G. F.) in flgchengleiche U n t e r a b s c h n i t t e eingeteilt wurde. Z u r I 3 e s t i m m u n g der Markier u n g s i n d i c e s in d e n Q u a d r a t e n w u r d e n n u r die Lobuli ausgewetter, bet d e n e n der A b s t a n d z w i s c h e n einer V . c . u n d d e m 32 dazugeh~Srigen G. F. in 9 kongruente Quadrate unterteilt werden konnte. Bet B e g i n n der D N S - S y n t h e s e (15--20 h nach Teilhepatektom i e [3]) bleibt ein s c h m a l e r Saum yon Leberparenchymzellen in ether A u s d e h n u n g y o n f8 e t w a 1/9 des G e s a m t a b s t a n d e s
oer/pheP I
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Fig. 1. Thymidin-~H-Markierungsindex (Ordinate: Prozent markierte Zellen) yon Leberparenchymzellen in fl~chengleiehen Quadraten (Abszisse) zwischen Venc~ centralis (rechts) und Glissonschem Feld(links) nach Teilhepatektomie. Mittelwerte a u s j e t9 Quadraten
z w i s c h e n V . c . u n d G. F, i m M a r k i e r u n g s i n d e x h i n t e r der b e n a c h b a r t e n Zone zuriick. D a s M a x i m u m der D N S - S y n t h e s e zeigen zu d i e s e m Z e i t p u n k t Zellen i m 2. u n d 3. Q u a d r a t . V o m 4. Q u a d r a t a n s i n k t der M a r k i e r u n g s i n d e x n a c h z e n t r a l steil a b (Fig. 1). 27 h n a c h T e i l h e p a t e k t o m i e finder sich i m e r s t e n Q u a d r a t gegeniiber d e m gleichen Bezirk 20 h n a c h Teilhepat e k t o m i e u n t e r s u c h t e r L e b e r ein u m e t w a t 0 0 % erhOhter M a r k i e r u n g s i n d e x . - - Die P a r e n c h y m z e l l e n , die d e m periport a l e n Feld a u f d e r V e r b i n d u n g s l i n i e zur V. c. u n m i t t e l b a r ben a c h b a r t liegen, n e h m e n in d e r P r o l i f e r a t i o n s k i n e t i k der L e b e r n a c h Teilhepatek~comie eine S o n d e r s t e l l u n g ein. Sie w e r d e n e n t g e g e n der v o r h e r r s c h e n d e n R i c h t u n g des D N S - S y n t h e s e b e g i n n e s riicklgufig in d e n Proliferationsprozel3 einbezogen. Mit U n t e r s t t i t z u n g d u r c h die D e u t s c h e F o r s c h u n g s g e m e i n schaft. Eingegangen am 18. Januar 1967 [1] HAI~KNESS, R. D.: J. Physiol. 116, 373 (1952). - - [9] GRISHAI% J. W.: Cancer Research 22, 842 (1962). - - [8] RABES, H., H. WRBA U. H. BaXNDLE: Proc. Soc. Exptl. Biol. Med. 120, 244 (t965).
Experimental Induction of Apical Flowering in Indeterminate Plant I m p a t i e n s B a l s a m i n a L.
Naturwisse~zscha/ten
p r o d u c i n g axillary floral b u d s in a c r o p e t a l succession a l t h o u g h t h e abscission of lower leaves was p r o n o u n c e d (Fig. I a). T h e details of t h e progressive c h a n g e s in t h e s t r u c t u r e of t h e s h o o t a p e x of d e b u d d e d p l a n t s e v e n t u a l l y l e a d i n g to i t s t r a n s f o r m a t i o n into r e p r o d u c t i v e s t a t e will be c o m m u n i c a t e d s u b sequently.
Fig. t. Two plants of Impatiens balsamim~ L. On the left is a normal plant with axillary fruits and flowers but vegetative apex. Leaves on the lower nodes have abscised. On the right is a debudded plant which shows large thick leaves and a terminal floral bud T h e s e r e s u l t s d e m o n s t r a t e t h a t t h e d i s t r i b u t i o n of s u b s t a n c e s c o n c e r n e d in r e p r o d u c t i o n in t h e apical m e r i s t e m is i m p o r t a n t in d e t e r m i n i n g t h e d e t e r m i n a t e or i n d e t e r m i n a t e n a t u r e of a plant. Eingegangen am 22. November I966 [1] NA~DA, K. K., and P. KU~AR: Planta 69, 249 (I966). - - [2] NANDA, K. K., and H. N. KRIS~tXA~OOI~THY:Planta 72, 338 (1966).
Temporary Callose Wall in the Generative Cell of Pollen Grains ALICJA G6RSKA-BRYLASS Department Of Plant Anatomy and Cytology g6d~ University, Poland I n m i c r o s p o r e s of Chlorophytum datum, Ch. comosum, H y a cinthus orientalis a n d Tradescantia bracteata, after t h e division of t h e nucleus, a g e n e r a t i v e cell is f o r m e d j u s t as in m o s t p l a n t s . I t is s i t u a t e d b y t h e pollen wall a n d is d i s t i n c t l y sep a r a t e d from t h e v e g e t a t i v e cell. T h e g e n e r a t i v e cell g r a d u a l l y c h a n g e s f r o m a lens-like to a spherical s h a p e a n d m o v e s to-
I(. K, NANDA and A. N. PUROHIT
Punjab University Botany Department, Chandigarh-14, India
Impatiens balsamina L. is a q u a l i t a t i v e s h o r t - d a y i n d e t e r m i n a t e p l a n t [1]. I t looked r a h t e r i n t r i g u i n g t h a t t h e t e r m i n a l m e r i s t e m r e m a i n e d v e g e t a t i v e while t h e a c r o p e t a l l y e m e r g i n g axillary m e r i s t e m s in close p r o x i m i t y to it b e c a m e floral u n d e r i n d u c t i v e p h o t o p e r i o d s [1, 2]. A surgical e x p e r i m e n t w a s d e s i g n e d to i n v e s t i g a t e if t h e apical m e r i s t e m could be ind u c e d to r e p r o d u c t i v e d e v e l o p m e n t b y s u c c e s s i v e l y r e m o v i n g t h e axillary floral b u d s t h e r e b y p r e v e n t i n g t h e u t i l i z a t i o n of floral s t i m u l u s on t h e w a y a n d e n a b l i n g it to r e a c h t h e apicai meristem. T w e n t y u n i f o r m p l a n t s raised in a plot f r o m seed s o w n on April 29, t966 were s u i t a b l y t a g g e d . I n f0 p l a n t s all t h e e x i s t i n g b u d s , w h e t h e r v e g e t a t i v e or floral, were r e m o v e d on J u l y 29, 1966, while in t h e r e m a i n i n g ones b u d s were left i n t a c t . T h e n e w l y e m e r g i n g b u d s on t h e d e b u d d e d p l a n t s were r e m o v e d as soon as t h e y a p p e a r e d , care b e i n g t a k e n to a v o i d i n j u r y to t h e apex. A considerable increase in t h e size, t h i c k n e s s a n d p i g m e n t a t i o n of leaves as well as in t h e n u m b e r a n d size of petiolar g l a n d s was o b s e r v e d in d e b u d d e d p l a n t s . T h e y o u n g e r leaves a t t h e t o p s t a r t e d c r o w d i n g u p t o w a r d s t h e first week of A u g u s t a n d t h e r e w a s swelling of t h e a p e x w h i c h e v e n t u a l l y d e v e l o p e d into a visible flower b u d b y t h e second w e e k of O c t o b e r (Fig. 1 b). Ill control p l a n t s t h e s h o o t a p e x c o n t i n u e d to grow
Fig. 1. Fluorescence of callose wall in the generative cells of pollen grains. Chlorophytum elatum (Magn. about 450 • w a r d s t h e centre of t h e pollen cell a n d t h e n it b e c o m e s spindles h a p e d . I n a n t h e r s of t h e species i n v e s t i g a t e d , t h e developm e n t of t h e pollen grains was n o t s y n c h r o n i c . Callose was identified b y s t a i n i n g w i t h resorcinol blue a n d b y fluorescence