KLINISCHE WOCHENSCHRIFT xe. J A H R G A N G

Nr. 42

2I.OKTOBER

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OBERSICHTEN. DIE BAKTERIOLOGIE UND SEROLOGIE DES KEUCHHUSTENS.

Krankheit

zu

erzeugon.

Einzelnen positiven Befunden

(SEIFFERT, KLIMENKO, FRAENKEL, INABA, SAU~R und I~IAIVIBRECHT) stehen zaMreiche negative Resultate gegentiber.

mit diesen Versuchen stehen neue mit die trotz mancher interessanter Einzelbefunde leider noch keine endgtiltige I~l/irung gebracht Aus dem Hygienischen Institut der Ulfiversit~it Heidelberg haben. W e a n auch alle diese soeben kurz aufgeftihrten M6g(Direktor: Prof. Dr. E. GOTSCHLICH). lichkeiten mehr oder minder erfolglos geblieben sind, d a n a I. k6nnte vielleichr trotzdem durch eine spezi]ische VaccineD i e /~tiologische Bedeuthng des Bacillus Bordet-Gengou oder Serumtherapie die Bedeutung des Bacillus Bordet-Gengou ~fir den t(euchhusten ist bisher noeh nieht sichergestellt. ffir den Keuchhusten bewiesen werden. Gerade in den letzten Die Mehrzahl der I~liniker und Bakteriologen ist allerdings Jahren hat m a n sich mit diesem Problem sehr intensiv beder Ansicht, in dem Keuchhustenbacillus den Erreger der schttftigt, besonders yon deutscher und amerikanischer Seite, Pertussis anzuerkennen. Soeben betonen aber noch MAN- man kann abet nicht sagen, dab dadurch bisher irgendein TEUE]~I. und DRESSLER 1, dab sie ,,die Bakterien yon BordetFortschritt erzielt worden ist. Jedoch gewinnt m a n schon Gengou" . . . . . bisher zwar nur bei Keuchhusten ge]unden haben, heute aus den Arbeiten einer 1Reihe so bedeutender Forscher daft aber ein Beweis ]i~r ihre E?regernatur noch aussteht". auf dem Keuchhustengebiet, wie MADSE~, SAVER, HAMBRECHT ~IV[C CORDOCK 2, R . K R A U S , t ~ I C H 3 und andere Forseher sehen U. a., den Eindruck, dab einer spezifischen Prophylaxe und i n dem ,,Erreger" ein ultravisibles Virus, wieder andere halten Therapie des Keuehhustens doch ein nicht zu unterscNitzenden Keuehhusten fiberhaupt nicht ftir eine Infektionskrank- der Wert zukommt. heir ( C z E R N Y U. a . ) . So erkennt man, obwohl wir naturgem/i3 im Rahmen Es erscheint eigenartig, dab bei der gro/3en /3edeutung dieser Arbeit die umfangreiche Literatur n u t andeutungsdieser Krankheit eine KltLrung der fl~tiologie noch nicht erweise berticksichtigen konnten, auf den verschiedensten Gezielt werden konnte. Die Voraussetzungen, um einen Mikrobieten Unstimmigkeiten und Widersprtiche. 1Vach unseren organ ismus als Erreger einer bestimmten K r a n k h e i t anzu- sogleich zu besprechenden Versuchen liegt der Hauptgrund biererkennen, sind in der Erftillung bestimmter ]3edingungen ]i~r zwei]ellos in der Tatsache, dab es noch nicht gelungen war, gegeben. Was zun/ichst den Nachweis des I(euchhusten- mit Sicherhelt den Bacillus Bordet-Gengou als solchen zu bacillus bei Keuchhustenkranken anbetrifft, so besteht hier identi]izieren und vet allem ihn mit Klarheit yon andcren die erste Schwierigkeit, findet m a n ihn doch, wenn tiberhaupt, h~imoglobinophilen Bacillen, insbesondere yon den Influenza: n u r etwa in den ersten 3 Krankheitswochen bzw. im katarrhalibacillen, abzutrennen. schen Stadium. Aber schon hier zeigen sich so viele UnstimH. KLXlNSCHMIDT~gebtihrt das Verdienst, dutch ein vermigkeiten in der Literatur, dab wir hinsichtlich seiner I-I~iufig- gleichendes Studium der h~moglobinophilen Bacillen auf keit alle beliebigen Prozentziffern aus den Ver6ffentlichungen optimalen NXhrb6den neuerdings die differentialdiagnostisch zusammenstellen k6nnten. I m m e r h i n ist abet bei erfahrenen wichtigsten Eigenschaften yon Keuchhusten- und InfluenzaUntersuchern der hohe Prozentsatz positiver Befunde im bacillen Iestgelegt zu haben, jedoch war auch durch dieses Frtihstadium sehr eindrucksvoll, und hierzu ist besonders zu Studium ein exakter Beweis ftir die gtiologische Rolle des erwXhnen, dal3 es bisher erst in wenigen F~illen gelungen ist, Keuchhustenbacillus noch nicht erbracht. Zahlreich sind bei Gesunden oder anderweitig E r k r a n k t e n den Bacillus weiterhin die Arbeiten, in denen neue N~ihrb6den ftir die Bordet-Gengou zu linden (insgesamt 4 F/ille yon FRAENKEL, Ztichtung der Keuehhustenbacillen beschrieben werden. G A R D N E R und L E S L I E $, sowie y o n STOLZOVA-SUTORISOV~5). Leider schenkte m a n abet der differentialdiagnostischen B e Die Erregernatur dieses Mikroorganismus beim Keuchhusten deutung dieser N/ihrb6den nicht die gentigende Beachtung, k6nnte fernerhin mit Sicherheit erbracht werden durch den denn keineswegs jeder aus Keuchhustenf~llen geztiehtete Nachweis spezi/ischer Serumreaktionen im Organismus der httmoglobinophile Bacillus ist auch der Bacillus BordetE r k r a n k t e n und Rekonvaleszenten. ~bereinstimmend ist Gengou. Werden n u n aber solehe St~imme irrttimlicherweise die Agglutinationsreaktiou mit Patientenserum yon fast als Keuchhustenbacillen diagnostiziert, wie es tats~iehlich alien Untersuchern abgelehnt worden, d a durch die grebe nach der Literatur und nach eigenen Feststellungen der T a l l Zahl der unspezifischen Reaktionen, dnrch zu geringen Anti- ist, und werden sie dann Itir die Antigenherstellung oder fur k6rpergehalt und Spontanagglutinabilit/it sich diese Methodik die Diagnose und Differentialdiagnose des Bacillus Bordetals nicht geeignet erwiesen hat. Gtinstigere Ergebnisse lieferte Gengou herangezogen, dann mul3 dies logischerweise zu Fehldie Komplementbindungsreaktion, deren ~ e d e u t u n g bereits sehltissen ffihren. I n diesen Tatsaehen erblicken wir n u n in yon BORDET und GENGOU6 erkannt wurde. Jedoch liegen der Hauptsache den Grund ftir die vielen Unstimmigkei• auch viele Berichte tiber negative Befunde vor (Sc~IULZ und Naturgem~ig sind noch weitere Grtinde anzuffihren. A n dieser HAENDEL .u.a.). Ferner ist das bisherige Untersuchungs- Stelle seie~ nut angefflhrt die Verwendung alter, degradierter material viel zu klein, wodurch bindende Schltisse bisher Laboratoriumsstamme fiir Tierversuche, unzureichende tterstellung als nicht zulassig erschienen. Au/3erdem k a n n bisher yon der .Antigene, Fehlerquellen der Zfichtung des .Erregers beim irgendeiner praktischen Bedeutung der Komplementbindungs- Kranken dureh Verwendung unzureichender N/ihrsubstrate u. a. reaktion fiir die serologische Diagnose des Keuchhustens nicht II die Rede sein. Auch allergische Reaktionen, die zahlreich Im Beginn unserer Untersuehungen begegneten uns zu,durchgeftihrt worden sind, vermochten in keiner Weise ben~ichs% die gleichen Schwierigkeiten bei de1: P r t i f u n g einer friedigende Resultate zu liefern. Man hat n u n versucht, dutch Tierversuche eine dem mensehlichen Keuehhusten ~ihnliche groBen Zahl sog, Keuchhusten- und Ifliluenzabacillen wie anderen Untersuchern. Da es uns n u n aber nicht darauf an* Die Untexsuehungen sind in Zusammenarbeit mit der Sero-Bakteriologisehen Abkara, einzelne bekannte Merkmale nachzuprfifen .und geteilung der I.-G.-Farbenindustrid Frankfttrt-HSchst (Prof. BIELING) durehgeffihr~ gebenenfalls neue zu finden, vielmehr mit Klarheit z u beworden. Der eine yon uns (W. SCH.I wurde zu diesen 2~rbeiten naeh Heidelberg l~eurlaubt. weisen, dab die eine Gruppe Keuchhusten-, die andere InWon

M. GUNDEL u n d W. SCHLOTER*.

Klinische Wochensehrift, x2. Jahrg.

Im

Zusammenhang

Keuchhuatenendotoxinen,

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KLINISCHE

WOCHENSCH

RIFT.

f l u e n z a b a c i l l e n darstellt, w a r z u n ~ c h s t v o n rein m o r p h o logischen o d e r k u l t u r e l l e n U n t e r s u c h u n g e n k e i n e 141~rung zu erwarten. I n U b e r e i n s t i m m u n g m i t H. KLEINSCI~MIDTL CHIEVITZ n e d MEYER 8, g A N G E R u n d W I L D T G R U B E 9 . U . a . v e r m o c h t e n s u c h wir zu e r k e n n e n , d a b m i t d e n z u r V e r f t i g u n g s t e h e n d e n N ~ h r b 6 d e n in d e r M e h r z a h l d e r F~tlle eine Auft e i l u n g in diese b e i d e n B a k t e r i e n a r t e n , e n t s p r e c h e n d d e n a n g e g e b e n e n Diagnosen, mSglich war. I m m e r f e h l t e a b e r d e r Beweis ftir die R i c h t i g k e i t dieser D i f f e r e n t i a l d i a g n o s e , u n d f e r n e r w a r es n i g h t s t e t s mSglich, eine E i n o r d n u n g aller S t ~ m m e durchzuffihren. Eine wichtige Feststellung brachte uns nun die P r f i f u n g des hautbiologischen Verhaltens (H. DOLD) d e r h ~ m o g l o b i n o p h i l e n Bacillen, die n n s aus d e m I n - u n d A u s l a n d zahlreich ffir diesen Z w e c k z u r Verffigung s t a n d e n . Bei d e r v e r g l e i c h e n d e n P r f i f u n g y o n fiber 7 ~ S t ~ m m e n h ~ m o g l o b i n o p h i l e r Bacillen, y o n d e n e n 54 K e u c h h u s t e n b a c i l l e n sein sollten u n d 2o v o n u n s f r i s c h aus a k u t e n G r i p p e f ~ l l e n d e r l e t z t e n E p i d e m i e gezfichtet waren, w a r n a c h d e n e n t s t e h e n d e n B i l d e r n eine sichere A u f t e i l u n g in 2 G r u p p e n mSglich. Die eine G r u p p e rief Each i n t r a c u t a n e r I n j e k t i o n schwere N e k r o s e n h e r v o r , w ~ h r e n d die a n d e r e eine w e c h s e l n d s t a r k e I n f i l t r a t i o n u n d E r y t h e m b i l d u n g , a b e r niemals N e k r o s e n b e d i n g t e (vgl. M. GUNDEL u n d ViT. SCHLf3TER 1~ n). Bei diesen B e o b a c h t u n g e n h a n d e l t es sigh u m d u r c h a u s t y p i s c h e , regelmfiBig u n d m i t S i c h e r h e i t v o n e i n a n d e r zu u n t e r s c h e i d e n d e B e f u n d e . E s f r a g t e sich n u n , ob diese A u f t e i l u n g in eine , , t o x i s c h e " u n d in eine ,,atoxische'" G r u p p e eine rein zuf/illige ist o d e r ob dieser A u f t e i l u n g eine w e i t e r g e h e n d e D i f f e r e n z i e r u n g i n n e r h a l b d e r h ~ m o g l o b i n o p h i l e n B a c i l l e n entsprfiche. E s w a r v o r a l l e m festzustellen, o b sigh n i g h t v i e l l e i c h t frisch g e z t i c h t e t e S t ~ m m e beider A r t e n toxisch, ~ltere o d e r d e g r a d i e r t e a t o x i s c h v e r h i e l t e n , o d e r o b w o m 6 g l i c h s o g a r ein g a n z unregelm~13iges Bild i m h a u t b i o l o g i s c h e n V e r h a l t e n b e i d e r B a k t e r i e n a r t e n vorliegt, oder ob schliel31ich i n n e r h a l b einer G r u p p e t o x i s c h e a n d a t o x i s c h e v o r h a n d e n sled. Toxische und atoxische StXmme prtiften wit nun hinsichtlich i h r e r m o r p h o l o g i s c h e n E i g e n s c h a f t e n u n d v o r a l l e m h i n s i c h t l i c h ihres Wachstums au] den verschiedenen NiihrbOden. D a b e i zeigte sich, d a b d i e s e m u n t e r s c h i e d l i c h e n V e r h a l t e n i m h a u t b i o l o g i s c h e n V e r s u c h stets die scharfe A u f t e i l u n g b e i d e r G r u p p e n in k u l t u r e l l e r H i n s i c h t e n t s p r a c h , w~ihrend m o r p h o l o g i s c h n u t oft eine solche D i f f e r e n z i e r u n g m 6 g l i c h erschien. D a m i t e r k a n n t e n wir die sichere A u f t e i l u n g der sog. K e u c h h u s t e n - u n d I n f l u e n z a b a c i l l e n in 2 G r u p p e n , sowohl a u f G r u n d d e r h a u t b i o l o g i s c h e n P r f i f u n g als a u c h d e r kult u r e l l e n U n t e r s u c h u n g e n . B r i n g e n w i r n u n i m Komple~nentbindungsversuch S t t t m m e d e r N e k r o s e b i l d n e r m i t K e u c h hustenimmunserum und vor allem mit Keuchhustenpatientenserum und Rekonvaleszentenserum zusammen, dann konnten wir i n diesen V e r s u c h e n spezifisch gegen diese M i k r o o r g a n i s m e n g e r i c h t e t e A n t i k 6 r p e r n a c h w e i s e n . A n d e r s w a r es bei d e r z w e i t e n G r u p p e dieser M i k r o o r g a n i s m e n , die i m t ( a n i n c h e n h a u t v e r s u c h keine N e k r o s e n h e r v o r z u r u f e n v e r m o c h t e n . Sie g a b e n s u c h i n d e n erw~ihnten K o m p l e m e n t b i n d u n g s v e r s u c h e n k e i n e R e a k t i o n e n m i t d e n in d e n K e u c h h u s t e n p a t i e n t e n s e r e n e n t h a l t e n e n A n t i k S r p e r n . Somit erkennen wit

zwei sehar] voneinander zu unterscheidencle Bakteriengrul~pen. Die eine Gruppe bildet Nekrose im Hautversuch, hat typische lculturelle Eigenscha/ten und reagie~'t im Komplementbindungsversuch spezifisch mit Keuchhustenantikdrpern. Die zweite Gruppe ru]t niemals Nekrosen hervor, hat andere, wohlcharakterisierte Eigenseha/ten und reagiert niemals spezi/isch mit Keuchhustenantik6rpern. Die erste Gruppe konnte damit als Bacillus Bordet-Gengou, die zweite Gruppe -- au] Grund weiterer Pri~/ungen -- als In/luenzabacillen diagnostiziert werden. A u f G r u n d dieser F e s t s t e l l u n g e n w a r e n wir d a h e r zu e i n e m A u s b a u d e r m i k r o b i o l o g i s c h e n U n t e r s u c h u n g e n in d e r g a g e u n d zu e i n e r g e n a u e n F e s t s t e l l u n g aller E i g e n s c h a f t e n b e i d e r B a k t e r i e n a r t e n , i n s b e s o n d e r e des K e u c h h u s t e n b a c i l l u s . Morphologisch h a n d e l t es sich bei d e n K e u c h h u s t e n b a c i l l e n d u r c h w e g u m kleinere, in d e r M i t r e d e r St~ibchen k a u m gef~irbte (Pol/dirbung !) u n d n i e m a l s S c h e i n f i i d e n b i l d u n g zeigende G r a m - n e g a t i v e Bacillen. D a m i t ist eine U n t e r s c h e i d u n g y o n d e m b e k a n n t e n Bild d e r I n f l u e n z a b a c i l l e n zwar m o r p h o l o -

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gisch oft mSglich, allerdings n i g h t regelm~iBig u n d a u c h n i g h t i m m e r leicht. G e l l n g t bei m o r p h o l o g i s c h e r U n t e r s u c h u n g die sichere E r k e n n u n g polgef~irbter St/ibchen, d a n e ist m a n zu der W a h r s c h e i n l i c h k e i t s d i a g n o s e ,,t(euchhustenbacillen" berechtigt. Die Zi~ehtung des Bacillus Bordet-Gengou gelingt sehr gut mit dem klassischen, yon BO~DXT und GENGOU angegebenen Kartoffelglycerinvollblutagar. Dieser Niihrboden ist durch KLIMENKO, SHO•TENSACK, BAILEY ll. a. verbessert und modifiziert worden. Diese Vollblutn~hrsubstrate geben in cler T a t ein optimales Wachsturn der IKeuchhustenbacillen bei der tErstziichtung, bei Hustenplatten bzw. bei der Fortziichtung in den ersten Genera/ionen. Auch die Iniluenzabacillen, deren optimaler N~hrboden der Levinthalagar ist, wachsen auf dem angeliihrten Niihrsubstrat gut. \V~hrend Keuchhustenbacillen zur Ausbildung makroskopisch erkennbarer lKolonien bei frischen St~immen etwa 48 Stunden, in den Erstlingskulturen etwa 3-- 4 Tage ben6tigen, erscheinen die Influenzakolonien gut erkennbar bereits nach 24sttindiger Bebriitung. In diJjerentlaldiagnostiseher Hinsicht sind die bisher besprochenen Niihrb6den deswegen nicht roll ausreichend, well die zur Dif%renzierung erforderlichen ch~rakteristischen Merkmale der Koloniebilder n e d der Verlinderungen der N~ihrsubstrate meistens nur andeutungswMse vorhanden sind. Darum ist der yon H. KLEINSCHMIDT angegebene ioproz. V o l l b h t a g a r rnit Zusatz yon 1--2% Traubenzucker als ein wertvoller Fortschritt zu bezeichnen. Nach entsprechenden Beobachtungen, bei denen sowohl der Blutgehalt als auch der Traubenzuckerzusatz variiert wurden, empfehlen wir ftir die praktische Diagnose und Differentialdiagnose einen 25proz. Vollblutagar mit Zusatz yon 2% Traubenzucker. Die Ursache fiir diese Modifikation des Kleinschmidtschen N~ihrbodens ist die, dab bei der Erstziichtung bzw. bei der Ziichtung frischer St~mme ein Vollblutgehalt yon lO% oft als nicht ausreichend gefunden wurde. Fiir die Richtigkeit dieser Beobachtung spricht iibrigens auch die Angabe yon LANGER und WlLDTGRUBE, die einen 5oproz. Vollblutzusatz iiir n6tig halten. F a r die Herstellung yon Antigenen usw. empfiehlt sich in der Tat ein solcher 5oproz. Vollblutagar, da auf diesem zur Gewinnung gr613erer Bakterienmengen das Wachsturn iippiger und schneller ist. Z u r s i e h e r e n Di//erentialdiagnose d e r K e u c h h u s t e n - gegenfiber d e n I n f l u e n z a b a c i l l e n h a t sich in u n s e r e n U n t e r s u c h u n g e n ein 25 proz. V o l l b l u t a g a r m i t 2 proz. T r a u b e n z u c k e r z u s a t z s e h r g u t bew~ihrt. M a k r o s k o p i s c h w a c h s e n die K e u c h h u s t e n b a c i l l e n a u f d i e s e m N / i h r b o d e n in g r a u - w e i B l i c h e n S t r i c h e n n a e h e t w a 48 stfindiger B e b r t i t u n g u n d zeigen n a c h w e i t e r e n 24 S t u n d e n eine d e u t l i c h e H~imolyse. D e m g e g e n f i b e r w a c h s e n die I n f l u e n z a b a c i l l e n g e h e m m t e r u n d i n E i n z e l k o l o n i e n , die t r a n s p a r e n t e r s c h e i n e n u n d bei d u r c h f a l l e n d e m L i c h t eine schw~irzlichgrfine V e r f i t r b u n g b e d i n g e n (M. GUNDEL u n d W. SCHLOTERn). Ffir die weitere d i f f e r e n t i a l d i a g n o s t i s c h e U n t e r s u c h u n g e m p f e h l e n wir d a n n d r i n g e n d die B e t r a c h t u n g d e r P l a t t e n m i t d e m Zeisslerschen P l a t t e n k u l t u r m i k r o s k o p . Die K o l o n i e n des Bacillus B o r d e t - G e n g o u sind Each 4 8 s t f i n d i g e r B e b r f i t u n g s c h a r f u m r a n d e t , k r e i s r u n d , u n d u r c h s i c h t i g , a b e r a u f f a l l e n d gl~Lnzend sowie s t a r k spiegelnd (H. KLEINSCHmDTT), n n d bei r o l l a u f f a l l e n d e m g i c h t ers c h e i n e n die K e u c h h u s t e n k o l o n i e n wie Q u e c k s i l b e r t r S p f c h e n ( C H I E V I T Z u n d MEyERS). Die Oberfl~che i s t hie a b g e f l a c h t , s o n d e r n a u c h n a c h lXngerem B r u t s c h r a n k a u f e n t h a l t s t e t s h a l b k u g e l i g gew61bt. D e m g e g e n f i b e r erweist sich die I
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KLINISCHE

WOCHENSCHRIFT.

1]lber das hautbiologische Verhalten seien die wichtigsten Beobachtungen kurz zusammengefal3t. Nach der intracutanen Injektion lebender Keuchhustenbacillen in die H a u t pigmentarmer Kaninchen, wie sie yon DOLD~s ftir die Prfifung des gewebsbiologischen Verhaltens yon Bakterien angegeben worden ist, zeigt sich oft schon nach 12--18 Stunden eine kreisrunde, etwas erhabene Infiltration am Ort der Injektion, die, im Gegensatz zu der durch Influenzabacillen bedingten Infiltration, weiB oder doch nur ganz geringftigig ger6tet ist. Die Oberfl~che dieser Infiltration verf~irbt sich in kurzer Frist bl~iulich: die ersten Anzeichen ether h~imorrhagisehen Nekrose. Bald l~il3t die Infiltration nach, w~ihrend sich die bl/iuliche Verf~irbung framer mehr verst~irkt und sich in 24 bis 48 Stunden post injectionem zur typischen Nekrose entwickelt. E t w a v o m 4. Tag nach der Injektion beginnt der Heilungsprozel3, und der nekrotische Schorf st6~3t sich allm~ihlich ab. Ein ganz anderes Bild sieht man bei Influenzabacillen, i 2 - - 2 4 Stunden naeh der intracutanen Injektion der gleichen Mengen lebender Bacillen tr i tt eine groi3e erhabene Infiltration ein, die fund oder oval mit mehr oder minder starker E r y t h e m b i l d u n g verbunden ist. In der Mitre besteht vielfach eine winzige Pustel, die aber nach wenigen Tagen zerI/illt. Die typischen Bilder der Infiltration und des E r y t h e m s sind nach 48--72 Stunden am ausgesprochensten und klingen dann allm~ihlich bis zur restitutio ad integrum ab. Eine Nekrose t r a t selbst bet der Prfifung virulentester, friseh bet der letzten Grippeepidemie gezfichteter Influenzast/imme niemals auf, w~ihrend auch die iiltesten und kulturell v611ig degradierten Keuchhustensfftmme stets eine deutliche Nekrose gaben. Damit hat sich uns der hautbiologische Versuch in ~edem Fall und mit volier Sicherheit zur Diagnose und zur Di]]erentialdiagnose bewdhrt. Alle weiteren Einzetheiten zur Technik usw. sowie die Abbildungen finden sich bet M. GUNDEL und W. SC~Li~TER11. III. Durch die kulturellen und hautbiologischen Untersuchungen, fiber die im Tell I I dieser Arbeit berichtet wurde, konnten die hier in Frage stehenden h~moglobinophilen Bacillen in 2 Gruppen aufgeteilt werden. Von dem Aus]all serologischer Studien war nun allein die Entscheidung abh~ingig zu machen, welehe Stgmme als Bacillus Borelet-Gengon und welche als Influenzabacillen zu bezeichnen sind. Diese Studien waren zuniichst mit A. KLOPSTOCK begonnen worden, mul3ten dann aber aus /inBeren Grfinden unterbrochen werden, um sp/iter yon uns wieder neu aufgenommen zu werden*. M. GIr~DEL und W. SCHL~TER1~ haben in der Tabelle 5 ihrer ersten Arbeit darauf aufmerksam gemacht, dab zahlreiche als Keuehhustenbacillen diagnostizierte St~imme durch die Zusammenfassung ihrer Untersuchungsergebnisse nicht als solche anerkannt werden konnten. Diese Feststellung ist im Hinblick auf jene Mitteilungen in der Literatur bemerkenswert, nach denen selbst auf serologischem Wege eine einwandfreie Diagnose des Keuchhustenbacillus unm6glich set. Gerade diese Annahme weist nachdrficklich darauf hin, dab auch bei der serologischen Methodik bisher Fehlerquellen vorgelegen haben mfissen. Wir waren in der Lage, durch die kulturellen und hautbiologischen Versuche frfihzeitig zu der Herstellung yon Antigenen zu gelangen, die aus echten Keuchhustenbacillen gewonnen waren. Zu den bisherigen Fehlerquellen kommen noch solche, die in der Technik des Komplementbindungsreaktion mit bakteriellen Antigenen selbst begrfindet liegen. Diese beiden Faktoren - - die Auswahl geeigneter Antigene usw. und die Schwierigkeiten in der Technik der Komplementbindungsreaktion - - veranlal3ten uns nach den ersten Versuchen yon W. I{ELLER, A. und E. t~LOPSTOCK15 ZU eingehenden Untersuchungen fiber die Durchffihrung der Komplementbindungsreaktion beim Keuchhusten. Selbstverstfmdlich k6flnen wir yon diesen Studien nur die wichtigsten Ergebnisse kurz referieren; hinsichtlich aller Einzelheiten * Auch an dieser SteIIe mSchten wit Herrn Professor Dr. SACHS danken, dab wit die serologisehen Untersuehungen unter seiner Oberleitung in seinem Institut durchffihren konnten. Besonders .sind wir auch ferner der teehn. Assistentin, FrL Vollbom. ffir ihre ~tete und erf01;reiche Hilfe dankbar.

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sei auf die ausfiihrliche Darstelhng bei M. GUNDELund W. SCHLLTM TER13 verwiesen. Bet der allgemein fiblichen Methodik der Komplementbindungsreaktion erwies sich die Anwendung einer gew6hnlichen Bakterienaufschwemmung in physiologischer Kochsalz16sung als durchaus ungeeignet. Die Zahl der unspezifischen Reaktionen war zu hoch, Kontrollsera reagierten zahlreich mit 14euchhustenantigenen, fibergreifende Reaktionen mi t I n f h enzaantigenen wurden beobachtet. Entsprechende Versuchsreihen lieferten nun den Beweis, dab durch eine ,,lecithinisierte Alkoholvaccine" unter Verwendung bestimmter Keimzahlen nach demVorgang yon E. WITEBSKY19fflr die GonorrhSe Fehlerquellen und Schwierigkeiten nahezu restlos beseitigt werden konnten. Die Sero-Bakteriologische Abteilnng der !.-G. Farbenindustrie A.-G. Behringwerke Marburg gibt auf Grund unserer Untersuchungen ein solches erprobtes Kenchhustenantigen ffir die Komplementbindungsreaktion ab. Durch die Verwendung dieses Keuchhustenantigens kamen wir in ~;bereinstimmung mit W. K E L L E R , A. und E. I{LOPSTOCK bei der Prfifung yon Hunderten yon Seren auf 5 - - 6 % unspezifische Reaktionen herunter. Diese an sich sehr geringe Zahl unspezifiseher Reaktionen konnte nun noch vollstXndig beseitigt werden. S t a t t dab die Komplementbindungsreaktion bei 37 ~ angesetzt wurde, lieBen wir Bindung und Ablauf der Reaktion sich bei o ~ vollziehen (im schmelzenden Eis). Diese Untersuchungen gingen auf Studien yon SACHS, KLOPSTOCK und T A K E N O M A T A 13 s o w i e T A K E N O M A T A 14 z u r f i c k , die im Jahre 1924 bei vergleichenden Priifungen fiber den Ablauf der Komplementbindungsreaktion die gr6gte Zahl unspezifischer Reaktionen bei Verwendung bakterieller Antigene bei o ~ fortfallen sahen. Somit war bet der Verwendung der beschriebenen Antigene und bet Ansetzen der Reaktion bet 0 ~ eine Komplementbindungsreaktion au] Keuchhusten gewonnen worden, die bet o]t nut sehr geringen Antik6rpermengen eine Spezi]itiit yon praktisch IOO % aufwies. Im Laboratoriumsbetrieb empfiehlt sich das vergleichende Ansetzen der 14omplementbindungsreaktion bet 37 ~ und bet o ~ deshalb, well man erstens so spezifische und unspezifische Reaktionen unterscheiden kann, und weil zweitens unter Umst~nden schwach positive, aber spezifische Reaktionen bet der 37 ~ bet der o ~ schw~icher ausfallen (allerdings beobachtet man gelegentlich auch das umgekehrte Bild). Eine weitere Feststellung unserer Untersuchungen ist die, dab nicht jeder Keuchhnsten- oder Influenzastamm ohne weiteres als Antigen geeignet ist: auch hier sind entsprechende Vorversuche notwendig. DaB auch die Immunseren naturgemM3 nur dutch Vorbehandlung mit geeigneten Stfimmen gewonnen werden k6nnen, ist j et zt ohne weiteres versffindlich. Auf diese beiden Faktoren - - Antigen und I m m u n s e r u m einerseits und Methodik a n d e r e r s e i t s - ist aber nach der bisherJgen Literatur beim K e u c h h u s t e n zuwenig W e r t gelegt worden, und in ihrer sorgf~ltigen Berficksichtigung liegt gerade der Erfolg der ganzen Reaktion. Nachdem diese technischen Schwierigkeiten beseitigt waren, war ~lie Durchffihrung der eigentlichen serologischen Untersuchungen einfach. Zun/ichst wurde eine sehr grol3e Zahl yon Keuchhusten-, Influenza- und fraglichen St~immen mit einwandfreien Immunseren nnd vor allem mi t Keuchhustenpatientenseren im Komplementbindungsversuch geprfift. Hierbei erwies sich die Komplementbindungsreaktion als ein fiberaus wertvolles differentialdiagn0stisches Hilfsmittel. Bet geeigneter Auswahl nnd richtiger t-Ierstellung yon Antigen und Antiseren gelingt eine sichere serologische Differenzierung. Besonders auch fragliche Sffimme, alte und degradierte St~tmme k6nnen serologisch einwandfrei diagnostiziert werden. Die Spezifit~it dieser 1Reaktionen wurde durch Absorptionsversuche best/itigt. Die Komplementbindungsreaktion stellt damit bet Zusammenbringen eines Keuchhustenserums mit einem Antigen au8 echten Keuchhustenbacillen eine spezifische Antigen-AntikSrper-Reaktion dar. Das gleiche gilt ffir unsere Versuche mit Influenzabacillenantigenen und Influenzabacillenimmunserum, w~ihrend alle Versuche mit Influenzaantigen und Serum yon Grippekranken nnd -Rekonvaleszenten negativ ausgefallen sind. Keuchhusten- und I22"

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KLINISCHE

WOCH.ENSCHRIFT.

Influenzabacillenantik6rper zeigen keinerlei Verwandtschaft. Auf Grund der Komplementbindungsversuche vertreten wir - - entgegen der Ansicht vieler anderer Autoren, die auch den Keuchhustenbacillus in mehrere Typen aufspalten mSchten die Auffassung, in ihm einen einheitlichen Typ zu sehen. Zwar ist die Variabilit~itsbreite des Bacillus Bordet-Gengou bei Fortztichtung auf kfinstlichem N~ihrsubstrat verh~ltnism~gig grol3, da site Laboratoriumsst/imme unter Umst~inden sogar auf Agar zu wachsen vermSgen, jedoch lassen such diese St~mme sich serologisch stets spezifisch erfassen. Sehr umfangreich warden vergleichende serologische Studien m i t Keuehhustenpatienten- uncl Rekonvaleszentenseren durchgeffihrt. Bei Berficksichtigung der beschriebenen technischen Fortschritte war eindeutig und in jedem Fall das Vorhandensein spezffiseh gegen den Bacillus Bordet-Gengou eingestellter Antik6rper im Serum Keuchhustenkranker nachzuweisen und ihre durchaus spezifische Erfassung bei der Verwendung einwandfreier Antigene. Dies wurde besonders gesichert durch den Nachweis der SpezifitXt der Komplementbindungsreaktion bei nicht an Keuchhusten erkrankten Individuen in fiber 300 F~llen. Hiernach erscheint die i~tio[ogische Rolle des

Bacillus Bordet-Gengou alsErreger des Keuehhustens sichergestellt. Diese Studien werfen naturgem~13 die Frage nach dem dingnostischen Weft der Komplementbindungsreaktion beim Keuchhusten auf. Bisher wurden yon nns unter Berticksichtigung von fiber 300 Kontrollseren 7~ F~ille zum Teil wiederholt untersucht*. Dabei zeigte sich, daf3 19 F/ille, die zwischen dem Anfang der 3. und dem Ende der 4. Krankheitswoehe untersucht warden, alle positive IReaktionen aufwiesen. 49 yon 7 ~ F~illen konnten zwischen dem Anfang der 3. Krankheitswoehe bis zum Ende des 4. lVionats gepriift werden. Von diesen reagierten 44 positiv, 2 zweifelhaft und nur 3 negativ. Zu den 3 negativen F~illen sei an dieser Stelle nur gesagt, dab es sich ste~s um ganz junge Kinder gehandelt hat, die 5, 2 bzw. 6 Monate alt waren und die zudem nur einmal untersucht worden sind. In den ersten 14 Krankheitstagen fallen die Reaktionen meistens negativ aus. B~-reits in der 3. Krankheitswoche reagierten bei uns alle F~ille positiv. Gewisse Schwierigkeiten scheinen eigentlich nur bei jungen S~uglingen vorzuliegen. \Vie bei den Pneumokokkeninfektionen des frfihen Kindesalters, nach GUNDEL und SCHAEFER 20, erkennen wir auch beim Keuehhusten die Abh~ngigkeit der Intensit~it des Antik6rperbildungsverm6gens v o m Alter, yon der,,serologischen Reifung" des wachsenden Orgalfismus, eine Beobachtung, die kfirzlich such yon W. KELLER, A. und E. KLOPSTOCK1~ erhoben wurde. f~'brigens sei im Hinbliek auf die diagnostische Bedeutung der Komplementbindungsreaktion noch erw/ihnt, dab wir bereits in einem Falle durch die serologischen Untersuchungen die klinische Diagnose ,,Keuchhusten" beriehtigen konnten, und dab der weitere klinische Verlauf uns reeht gab sowie den Kliniker veranlaf3te, a u c h klinisch die Keuchhustendiagnose falleilzulassen. Sehon auf Grund dieser Untersuchungen, die noeh im weiteren Ausbau befindlich sind, erkennt man die groBe Bedeutung der Komplementbindungsreaktion als serologisch-diagnostisches Hilfsmittel and zur Erkennung und Deutung der Vorg~inge bei der immunologischen Auseinandersetzung zwisehen Mikro- and ~akroorganismus. IV. Die bisher berichteten mikrobiologischen Untersuchungen haben gezeige, dab in dem Bacillus ]3ordet-Gengou tier Erreger des Keuehhustens zu erblicken ist. Unsere serologischen Studien haben welter bewiesen, dab der menschliche Organismus das Eimtringen des Keuchhustenbacillus mit der Bildung spezifischer Antik6rper beantwortet. Diese Antik6rper sind in praktisch jedem Fall etwa yon der 3. Krankheitswoche ab nachweisbar, falls es sich nicht um S/iuglinge in den ersten Lebensmonaten handelt, bei denen die Antik6rperbildung verz6gert einzutreten pflegt. * Ffir'die'i313erlassung. zahlreicher 131utproben sowie vieler St{imme sind wir zahlreichen in- and ausl~ndischen Kliniken und Instituten ztl lebhafte m Dank verpflichtet (vgl M~ G U N D E L un~l W. SCHLI~TER n, li).

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2I. OI{TOBER i933

Diese Befunde berechtigen zu der Annahme, dab m6glieherweise eine spezifische Prophytaxe und eine spezifische Therapie der Keuchhustenerkrankung des Menschen m6glich ist. In Zusammenarbeit m i t W. KELLER (Universit~ttskinderklinik Heidelberg) haben wir durch serologische Untersuchungen festzustellen versucht, in welsher Weise der kindliche Organismus auf prophylaktische Injektionen m i t Keuchhustenantigenen reagiert. Selbstverst~indlich handelte es sich hierbei nur um gefiihrdete Kinder. Es zeigte sich, dab im Gegensatz zu der nattirlichen Immunisierung beim Keuchhustenkranken die Antik6rperbildung bei kfinstlich Immunisierten bereits am Ende der ersten Woche hohe Werte erreicht. Stets handelte es sich um spezifisch gegen den Bacillus Bordet-Gengou gerichtete Antik6rper, deren Titerh6he bereits am Ende der ersten Woche erheblich hSher war, als die durchweg gefundenen Maximalwerte nach iiberstandener Keuchhustenerkrankung. Diese Feststellungen berechtigen zu der Hoffhung einer erfotgreichen Vaccineprophylaxe und -therapie. Der Grund Ifir die nach der Literatur bisher scheinbar vorliegenden Mil3erfolge liegt teils in der bisher unzweckm~Bigen Zusammensetzung der Vaccine, teils in der nicht ausreichenden 1Kenge des injizierten Antigens nnd schlieBlich vielfach im ungeeigneten Zeitpunkt des Einsetzens einer spezifischen Therapie. Die Ergebnisse dieser Untersuchungen werden nach ihrem AbschluB durch lX~. GUND~L, W. KELLER und W . SCHL~TER ver6ffentlieht. Zusammenfassung: Trotz der bedeutsamen Rolle des Keuchhustens, der zu den gef~ihrIichsten Krankheiten des Kindesalters geh6rt und der in bestimmten Altersklassen in vielen Jahren und L~ndern mehr Todesf~ille fordert als Masern, Seharlach und Diphtherie zusammen, ist seine ~tiologie und der mutma/31icbe Erreger noch in vieler Hinsicht ungenfigend erforseht.

Das wichtigste Ergebnis unserer Untersuchungen ist, daft es gelingt, die Bordet-Gengou-Bacillerb durch bakteriologische un~ serologische Methodeu aus der Gruppe der hdmoglobinophilcn Std~bchen herauszunehmen sowie exakt zu bestimmen, und daft es weiterhin gelang, die ditiologische Bedeutung dieser schar]umrissenen Balcterienart ]i~r den Keuchhusten sicherzustellen. Die Charakterisierung des Keuehhustenbacillus BordetGengou gelingt : a) mittels kultureller Untersuchungsmethode~: mit diesen gelangt man stets zu ein er klaren und einwandfreien Diagnose und Differenzierung yon Keuchhusten- und Influenzabacillen. Die A r t des Wachstums, das Aussehen der Kolonien und die NXhrbodenansprfiche sind bei beiden Arten verschieden; b) dureh die Prfifung des gewebsbiologischen Verha.ltens an der Rtickenhaut yon Kaninchen (Albinos). Man erh~lt mittels dieser Methode stets grundlegende Unterschiede zwischen beiden Bakterienarten. Echte Keuchhustenbaeillen rufen naeh intracutaner Injektion schwere Nekrosen hervor, w~hrend Influenzabacillen eine wechselnd starke Infiltration und Erythembildung, abet niemals Nekrosen bedingen; c) mit der Komplementbindungsreaktion. Stets gelingt damit auf serologischem Wege die sichere Unterscheidung yon Keuchhusten- und Influenzabacillen. Die im Kaninchen-Immunserum nachweisbaren, spezifisch gegen den Bacillus Bordet-Gengou gerichteten Antik6rper wurden such im Serum Keuchhustenlcranlcer und i m Rekonvaleszentenserum nachgewiesen. Diese Antik6rper sind s-treng spezifisch nur gegen den Bacillus Bordet-Gengou.

Hieraus ergibt sich, daft die KomplementbindungsreaIction mit Keuchhustenbacillen bel den Keuchhustenkranken charMcteristisch ist unct weiterhin, dab der Kcuchhustenbacillus der regelm~ifiige Erreger des Keuchhustens ist. D am i t koramt der Komplementbindungsreaktion auch eine hohe diagnostische Bedeutung zu, nachdem dutch technische Verbesserungen die 3/[6glichkeit gegeben wurde, unspezifische Reaktionen auszuschalten. Unsere Feststellungen geben auBerdem auch eine sichere Grundlage ab ffir den weiteren Ausbau einer speziJischen Prophylaxe und Therapie. L i t e r a t u r : ~ NIANT~UFEL U. DRESSL~R, Klin. Wschr. x933, 14o5 . _ 2 Mc CORDOCK, Proc. Soc. exper. Biol. a. Med. 29, 9, 1288

2I. OKTOBER 1933

KLINISCHE

WOCHENSCHRIFT

(1932). -- a IRICI~, Bull. Hopkins Hosp. 5 I, 346 (1933). -- ~ GARDNER U. LESLIE, J. of Hygt 3 I, 423 (1931 ) -- Lancet I, 9 (1932). -5 STOLZOv:-SUTORISOV,~, Bratislav. lek. Listy 1o, 492. -- a BORDET U. GENGOIJ, Zbl. Bakter. I Orig. 58, 573 (1911). -- ~ H. KLEINseI~Mil)~, Klin. Wschr. I93I, 1847. - - s CI~IEVI~Z u. MEYER, Arch. Kinderheilk. 66, 186 (1918). -- ~ LANGER u. WlLI)TGRUBE, Z. Kinderheilk. 52, 716 (1932). - :0 M. GUNI)EL U. W. SCHLOTER, Klin. Wschr. x933. -- 11 M. GUNDXL U. W. SCHLt~T~R, Zbl. Bakter. I Orig. I29, 461 (1933). -- 1~ M. GUNDEL u. W. SeI~LOTER, Z. Immun.-

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forsch, im Druck (1933). -- 13 SACHS, KLOPSTOCK U. TAKENOMATA, Klin. Wschr. I924, 21. -- ~ M. TAKENOMATA, Z. Imnlunforsch. 4 I, 5o8 (1924) . _ 15 W. KELLER, A. KLOPSTOCI< U. E. KLO~STOCK, Z. Kinderheilk. 55, 112 (1933). -- ~ W. BACHMANN U. E. BURGI~ARD, Z. Kiltderheilk. 39, 465 (1925). -- ~ F. WILDTGRUBE, Erg. inn. Med. 45, 643 (1933). -- ~s DOLl), Zbl. Bakter. I Orig. xoe, I, 257, 417, lO3, 321 (1927). -- ~ E. WI~EBSKY, Klin. Wschr. 1933, 1455. -- ~0 M. GUNDEL U. W. SCHAEFER, Z. Kiliderheilk. 52 , 269 (1932).

ORIGINALIEN. DIE ZUSAMMENARBEIT DER ZELLEN UND DES KOLLOIDS BEI DER INKRETORISCHEN TATIGKEIT DER SCHILDDROSE*. Won

WERNER GRAB. Aus dem Pharmakologischen Institut Freiburg L Br. (Direktor: Prof. JANSSEN).

Die F r a g e n a c h d e r Junktionellen Bedeutung d e r B a u e l e m e n t e d e r Schilddriise, also d e r Zellen u n d des Kolloids d e r T h y r e o i d e a , ist s c h o n s e h r frfih g e s t e l l t w o r d e n . Die N o t w e n d i g k e i t h i s t o l o g i s c h e r U n t e r s u c h u n g e n u n d ihre D e u t u n g fiir Z w e c k e d e r k l i n i s c h e n u n d p a t h o l o g i s c h - a n a t o m i s c h e n D i a g n o s t i k liegt' a u f d e r H a n d . I c h will h i e r k e i n e gewissenh a f t e A u f z ~ h l u n g aller d e r i n v i e l e n A r b e i t e n n i e d e r g e l e g t e n Anschauungen und Deutungen der Schilddr/isenhistologie geben, z u m a l j a viele dieser B e f u n d e n u t m e h r h i s t o r i s c h e s I n t e r e s s e b e s i t z e n . O b d a s Kolloid ein S e k r e t i o n s - o d e r Deg e n e r a t i o n s p r o d u k t ist, o b es i n v i v o k o n s i s t e n t o d e r fliissig, o b es ein so o d e r so g e a r t e t e r Eiweil3k6rper ist, all d a s sind F r a g e n , die g e g e n i i b e r h e u t i g e n b r e n n e n d e r e n P r o b l e m e n sehr an Bedeutung zuriicktreten. W e l l n m a n h e u t e i m s t a n d e ist, a u s e i n e m h i s t o l o g i s c h e n S c h i l d d r f i s e n b i l d eines g e s u n d e n Tieres einigermal3en sicher e i n e n R i i c k s c h h B a u f die T ~ t i g k e i t d e s O r g a n s zn ziehen, so v e r d a n k t m a n d a s in e r s t e r Linie CI~AMER u n d L U D F O R D 1, die die e r s t e e x p e r i m e n t e t l - m o r p h o l o g i s c h e t 3 e g r f i n d u n g ftir die f u n k t i o n e l l e D e u t u n g d e r m i k r o s k o p i s c h e n S c h i l d d r i i s e n b i l d e r geliefert h a b e n . Die b e i d e n e n g l i s c h e n F o r s c h e r b e o b a c h t e t e n n ~ m l i c h , d a b bei K ~ l t e e i n w i r k u n g a u f d a s V e r s u c h s tier, w e n n also die Schilddrtise z u r W ~ t r m e r e g u l a t i o n v e r m e h r t t ~ t i g sein mul3, eine U m s t e l l u n g i m h i s t o l o g i s c h e n t3ild d e r T h y r e o i d e a erfolgt. Die n o r m a l e Schilddriise m i t i h r e n grol3en, m i t d i c k e m r o t e n Kolloid gefiillten F o l l i k e l n u n d i h r e n k l e i n e n Zellen, v e r w a n d e l t sich in eine g a n z a n d e r e Schilddriise: die ZelleI1 v e r m e h r e n sich, w e r d e n gr6Ber, h o c h zylindrisch, u n d d a s Kolloid wird a u g e n s c h e i n l i c h weniger, Gleichzeitig m i t diesen m o r p h o l o g i s c h e n B e f u n d e n a n d e r Drtise w u r d e n k l i n i s c h e E r s c h e i n u n g e n b e o b a c h t e t , die n u r die F o l g e g e s t e i g e r t e r A u s s c h i i t t u n g y o n S c h i l d d r t i s e n h o r m o n ins B l u r sein k o n n t e n . Diese K o i n z i d e n z d e r b e i d e n V o r g ~ n g e : H o r m o n a u s s c h i i t t u n g in die B l u t b a h n u n d b e g l e i t e n d e m o r p h o l o g i s c h e U m s t e l l u n g a n d e r Drtise m i t V e r s c h w i n d e n des Kolloids, w u r d e b e r e i t s y o n CRAMER als g r u n d l e g e n d e r k a n n t . D e r experim e n t e l l - m o r p h o l o g i s c h e Hinweis ftir eine v e r m e h r t e I n k r e t i o n d e r Schilddrtise s c h i e n e r b r a c h t . Nach diesen Versuchen schlol3 m a n jetzt auch umgekehrt aus der S t r u k t u r der Drt~se auf ihre augenblickliche Funktion. Man iibertrug d a n n weiterhin diese SchluBfolgerungen auch auf die Pathologie d e r Sehilddriise, und n u n schieli der Weg fiir die funktionelle Diagnostik der morphologischen Schilddri~senbilder frei, der zur KonstruktioI1 umfassender Schemata ffihrte, ill die alle klinisch gefundenen Formen mit all ihren Begleiterscheinungen eingereiht werdeli muBten. A n g e s i c h t s dieser w e i t g e h e n d e n S c h l u B f o l g e r u n g e n , die aus d e n h i s t o l o g i s c h e n S e h i l d d r t i s e n b i l d e r n gezogen w u r d e n , m u B es v e r w u n d e r l i c h e r s c h e i n e n , d a b eine experimentell-physiologisch gesieherte Fundierung ftir alle diese D e u t u n g e n eigentlich Jehlt. * Nach einem tiir den 4. Juli 1933 ffir die Med. Gesellschaft in Freiburg i. B. angekiindigten Vortrag, der wegen ~uflerer Umst~nde ausfallen muBte.

W e n n m a n s c h o n aus d e n h i s t o l o g i s c h e n t3ildern a b l e i t e t e , d a b hei v e r m e h r t e r S c h i l d d r t i s e n t g t i g k e i t d a s Kolloid sich v e r m i n d e r e , d a b es also o f f e n b a r in d e n a l l g e m e i n e n K r e i s l a u f a u s g e s c h t i t t e t wiirde u n d d o r t seine S c h i l d d r t i s e n w i r k u n g austibe, so m u B t e daffir die K e n n t n i s v o r a u s g e s e • werden, d a b d a s Kolloid s e l b s t w i r k s a m e S c h i l d d r t i s e n s t o f f e f i b e r h a u p t e n t h ~ l t . Diese n o t w e n d i g e V o r a u s s e t z u n g f e h l t a b e r b i s h e r v611ig. S i e h t m a n die m o d e r n e n H a n d b i i c h e r bezfiglich d e r 13edeutung des K o l l o i d s d u r c h , so f i n d e r m a n k e i n e n eind e u t i g e n Aufschlul3. D e r A u f g a b e , diese Liicke auszuffillen, g a l t d e r erste Teil m e i n e r Versuche~ Die F r a g e n a c h d e r . f u n k t i o n e l i e n B e d e u t u n g y o n Koiloid u n d Zellen d e r Schilddriise ist n ~ m l i c h h e u t e w i e d e r b e s o n d e r s aktuell. Ftir die A u f k l ~ r u n g d e r W e c h s e l b e z i e h u n g e n d e r Drfisen m i t i n n e r e r S e k r e t i o n spielen j a g e r a d e m o r p h o l o g i s c h e U n t e r s u c h n n g e n eine groBe Rolle. Bei dieser praktisehen Wichtigkeit des S t r u k t u r p r o b l e m s d e r Schilddriise m u g t e zun~tchst die F r a g e gel6st w e r d e n : Enth~lt das normale Kolloid i~berhaupt jodhaltige Stoi]e? Seit m a n d u t c h HARINGTONS A r b e i t e n 2 g e l e r n t h a t , d a b die Schilddrtise n e b e n h o c h a k t i v e n S t o f f e n a u c h u n w i r k s a m e enthXlt, n ~ m l i c h D i j o d t y r o s i n u n d v i e l l e i c h t n o c h a n d e r e , k o m m t n o c h ein neues, w e s e n t l i c h e s M o m e n t h i n z u : Enthi~lt das Kolloid wirksame Schilddri2sensto]Je, vielleicht sogar vom Charakter des Thyroxins? O d e r e n t h ~ l t es n u r u n w i r k s a m e V o r s t u f e n ? B e s t e h t es v i e l l e i c h t ausschliel31ich a u s D i j o d t y r o s i n , u n d ist es also i i b e r h a u p t k a u m w i r k s a m ? W i r d es d u r c h W i r k u n g eines F e r m e n t s e r s t w i r k s a m g e m a e h t ? Alle diese F r a g e n sind n o c h often. I h r e e x a k t e B e a n t w 0 r t u n g bed e u t e t die w t i n s c h e n s w e r t e e x p e r i m e n t e l l e S i c h e r u n g d e r so h ~ u f i g a n g e w a n d t e n f u n k t i o n e l l e n D e u t u n g d e r Bilder. I c h v e r s u c h t e i m e r s t e n Teil m e i n e r V e r s u c h e f e s t z u s t e l l e n , o b das Kolloid d e r Schilddrtise w i r k s a m e Stoffe i i b e r t f a u p t enth~lt. Zungchst muBte das Kolloid aus dell Schilddrfisen gewolineli werden. Das geht relativ einfach: m a n m a c h t Gefrierschnitte voi1 den ganz frischen Schilddrt~sen, den Schnitt etwa 4 ~ dick und extrahiert die Schnitte mit Ringerl6sung. Die Ringerl6sung, die n u r das Kolloid gel6st enthglt, wird n u n bei 35 ~ getrocknet nnd das Trockenpulver untersucht. Ein paar VorsichtsmaBregeln, Schnittdicke, Ringerl6sung, Temperaturen, mfissen einigermaBen eingehalten werden, wenn m a n brauchbare Versuchsergebnisse erzielen will. D a s e r h a l t e n e K o l l o i d t r o c k e n p u l v e r w u r d e n u n zun~tchst einmal auf seinen Jodgehalt untersucht. Dieser betr~gt in e i n e r M i s c h p r o b e ( K o l l o i d p u l v e r airs e t w a 3 ~ Schafsdriisen) 0,34 o d e r 0,38 % a u f T r o e k e n k o l l o i d bezogen. N u n weiB m a n ja, d a b die J o d h a l t i g k e i t eines S c h i l d d r i i s e n p r ~ p a r a t s n o c h k e i n e n b i n d e n d e n Schlul3 a u f seine W i r k s a m k e i t zulaBt. M a n m u B t e das Thyroxin i m Kolloid b e s t i m m e n , also die w i r k s a m e F r a k t i o n des g e s a m t e n J o d g e h a l t s . D a s g e h t a b e r m e t h o d i s c h w i e d e r n i c h t . Die I s o l i e r u n g y o n T h y r o x i n ist bei d e n g e r i n g e n M e n g e n aussichtslos, die F a r b r e a k t i o n e n a u f T h y r o x i n sind n i c h t a n w e n d b a r . E s g e l i n g t a b e r s e h r einfach, sich eine V o r s t e l l u n g y o n d e m m u t m a l 3 l i c h e n T h y r o x i n g e h a l t zu bilden, w e n n m a n , wie I-IARINGTON d a s vorschl~tgt, die bei p u = 5 a u s f a l l e n d e J o d e i w e i B f r a k t i o n g e n a u e r b e s t i m m t . D i e Gr6Be dieser J o d f r a k t i o n , die b e i Pu = 5 f&llt, also s~urelinl6slieh ist, b e z e i c h n e t m a n als Thyroxinjod. Diese T h y r o x i n j o d b e s t i m m u n g e n ill v i e l e n K o l l o i d p r / i p a r a t e n e r g a b e n n u n , d a b d a s Kolloid aueh-~'odhaltige Stoffe e n t h a l t e n muB, die gem Thyroxin ~n ihren