Phytothérapie DOI 10.1007/s10298-015-1005-4

ETHNOPHARMACOLOGIE

Étude ethnobotanique, pharmacologique et phytochimique de quelques plantes médicinales congolaises à potentialité antitussive Phytochemical, pharmacological and ethnobotany study of some Congolese plants with potential antitussive B.A.E. Loufoua · D.J. Bassoueka · G.F. Nsonde Ntandou · J. Nzonzi · A.W. Etou-Ossibi · J.M. Ouamba · A.A. Abena © Lavoisier SAS 2015

Résumé Ce travail a permis d’ajouter au répertoire congolais les plantes à potentialités antitussives. L’enquête sur le terrain auprès des personnes ressources nous a permis de recenser 17 plantes dont le Chenopodium ambrosioides Lin (Chenoponaceae) et le Erigeron floribundus Kunth. qui ont été les plus citées. Les feuilles de Chenopodium ambrosioides Lin (Chenoponaceae) et de Erigeron floribundus Kunth. (Asteraceae) possèdent une activité antitussive. L’activité de ces plantes a été évaluée chez le cobaye en utilisant le modèle classique d’acide citrique. Le décocté de Erigeron floribundus et l’infusé de Chenopodium ambrosioides réduisent significativement le nombre de quintes de toux. L’étude de la toxicité aigüe a révélé que ces extraits ne sont pas toxiques jusqu’à la dose de 3200 mg/kg.

the most quoted. The leaves of Chenopodium ambrosioides Lin. (Chenoponaceae) and of Erigeron floribundus Kunth (Asteraceae) possess an antitussive activity. The effect of Chenopodium ambrosioides Lin. (Chenoponaceae) and the Erigeron floribundus Kunth. (Asteraceae) was evaluated in guinea pig using citric acid induced cough method. The decoction of Chenopodium ambrosioides leafs and the infusion of Erigeron floribundus leafs decreased significantly the number of cough quints. The study of acute toxicity revealed that those extracts are not toxic.

Mots clés Chenopodium ambrosioides · Erigeron floribundus · Activité antitussive

Introduction

Abstract This work permitted to add to the Congolese index the plants antitussive. The investigations on the land by the users of the properties of the plants permitted us to count 17 plants of which the Chenopodium ambrosioides Lin (Chenoponaceae) and the Erigeron floribundus Kunth. were B.A.E. Loufoua (*) · D.J. Bassoueka · G.F. Nsonde Ntandou · A.W. Etou-Ossibi · A.A. Abena Laboratoire de biochimie et de pharmacologie de la faculté des Sciences de la Santé, Université Marien Ngouabi, BP 69 Brazzaville-Congo e-mail : [email protected] B.A.E. Loufoua · D.J. Bassoueka · G.F. Nsonde Ntandou · J. Nzonzi · A.W. Etou-Ossibi Département de biologie et physiologie animale, faculté des Sciences et Techniques, Université Marien Ngouabi, BP 69 Brazzaville-Congo J.M. Ouamba Laboratoire d’études physico-chimiques, faculté des Sciences et Techniques, Université Marien Ngouabi, BP 69 Brazzaville-Congo

Keywords Chenopodium ambrosioides · Erigeron floribundus · Antitussive activity

Dans les pays émergents en général et au Congo en particulier, la population recourt aux plantes médicinales pour les soins de santé primaire [1,2]. Chenopodium ambrosioides (C.a.) Lin est une Chenoponaceae largement utilisée en médecine traditionnelle contre la toux, la fièvre, l’épilepsie, l’hémiplégie et comme vermifuge [2-5]. Erigeron floribundus (E.f) Kunth. est une Asteraceae utilisée en médecine traditionnelle contre la toux, l’ophtalmie, l’épilepsie, la tuberculose, l’asthme, la fièvre, l’inflammation, la douleur [4-6]. La présente étude a pour objectif de faire une enquête ethnobotanique, de rechercher une éventuelle activité antitussive des extraits aqueux de ces deux plantes en utilisant le modèle classique d’acide citrique chez le cobaye et de faire le screening phytochimique.

Matériel et méthodes Étude ethnobotanique En plus de la recherche bibliographique, une enquête a été réalisée auprès des personnes ressources et des herboristes

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afin de collecter des informations sur les plantes utilisées contre la toux, leurs modes d’administration et de préparation. Animaux Des rats albinos (souche wistar) mâles et femelles de poids compris entre150 et 200 g et des cobayes dont le poids varie entre 300 g et 500 g ont été utilisés. Ces animaux recevant de l’eau ad libitum ont été mis à jeun depuis 24 h. Matériel végétal Les feuilles de Chenopodium ambrosioides Lin et de Erigeron floribundus Kunth. ont été récoltées à Bacongo (Brazzaville-Congo) entre avril et mai et sont séchées à la température ambiante à l’abri du soleil au laboratoire de biochimie et de pharmacologie de la Faculté des Sciences de la Santé. L’identification a été faite au Laboratoire de Biologie et Physiologie Végétale de la Faculté des Sciences et à l’herbier du Centre des Etudes des Ressources Végétales (CERVE). Préparation des extraits 20 g de poudre des feuilles de C.a. préalablement séchées et réduites en poudre sont mises en contact avec 250 ml d’eau préalablement bouillie pendant 20 min ; ensuite, le mélange est filtré sur du coton hydrophile. Le filtrat obtenu est ensuite évaporé. Le résidu sec obtenu est mis en solution avec 5 ml d’eau distillée jusqu’à dissolution totale de l’extrait. La solution obtenue est de 2 mg/ml. 20 g de poudre des feuilles de E.f. préalablement séchées et réduites en poudre sont portées à ébullition dans 250 ml d’eau pendant 15 min. Le décocté obtenu est filtré sur du coton hydrophile. Le filtrat obtenu est ensuite évaporé. Le résidu sec obtenu est mis en solution avec 5 ml d’eau distillée jusqu’à dissolution totale de l’extrait. La solution obtenue est de 2,5 mg/ml. Toxicité aiguë des extraits Onze (11) lots de cinq (5) rats chacun ont été constitués de manière suivante pour chaque plante :

• • •

Le lot 1 a reçu l’eau distillée à la dose de 0,5 ml/100 g de poids corporel Les lots 2, 3, 4, 5 et 6 ont reçu respectivement le C.a. aux doses de 200,400, 800, 1600 et 3200 mg/kg de poids corporel Les lots 7, 8, 9, 10, 11 ont reçu respectivement l’extrait de E.f aux doses de 200, 400, 800, 1600 et 3200 mg/kg de poids corporel

Les produits sont administrés par voie orale. Les animaux ont été observés macroscopiquement pendant 6 heures puis 24, 48 et 72 heures après l’administration des produits. La mortalité a été déterminée 6, 24, 48 et 72 heures après l’administration .des produits [2]. Étude de l’activité antitussive L’activité antitussive a été recherchée chez le cobaye par la méthode rapportée par Sanogo [1]. Cette méthode consiste à vérifier le pouvoir inhibiteur des produits sur la toux induite par l’acide citrique (30%). Huit (8) lots ont été constitués comme suit :

• • • •

Le lot 1 a reçu l’eau distillée à la dose de 0,5 ml/100 g de poids corporel Les lots 2, 3 et 4 ont reçu respectivement le C.a. aux doses de 200, 400 et 800 mg/kg de poids corporel Les lots 5, 6 et 7 ont reçu respectivement le E.f. aux doses de 100, 200 et 300 mg/kg de poids corporel Le lot 8 a reçu la substance de référence, (codéine) à la dose de10 mg/kg

Une heure après l’administration des produits par voie orale, les animaux sont exposés à l’aérosol d’acide citrique pendant 5 min, tout au long de l’exposition et au cours des 5 minutes suivantes, on évalue le nombre de quintes ou d’éternuement émis par l’animal. Étude du mécanisme d’action des extraits Le mécanisme d’action des extraits a été étudié en utilisant la méthode rapportée par Okémi [2]. Cette étude consiste à rechercher une éventuelle interaction des produits étudiés avec le système opiacé. Pour ce faire, la naloxone (Narcan®) qui est un antagoniste pur et compétitif de la morphine est utilisée. Quatre (4) lots de cinq(5)) animaux chacun ont été constitués comme suit :

• • • •

Le lot 1 a reçu l’eau distillée à la dose de 0,5 ml/100 g de poids corporel Le lot 2 a reçu le C.a. à la dose de 200 mg/kg de poids corporel Lot 3 a reçu le E.f. à la dose de 200 mg/kg de poids corporel Le lot 4 a reçu la substance de référence (codéine phosphate) à la dose de10 mg/kg

Quarante-cinq (45) minutes après l’administration des produits, la naloxone est injectée à la dose de 1 mg/kg, par voie intra péritonéale. Une heure après l’administration des produits, les animaux sont exposés à l’aérosol d’acide citrique pendant cinq (5) minutes. Tout au long de l’exposition et au

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cours des cinq(5) minutes suivantes on évalue le nombre de quintes ou d’éternuements émis par l’animal.

sioides et aux doses de 300 mg/kg pour Erigeron floribundus ; la naloxone n’influence pas cet effet (Tableau 3).

Screening phytochimique

Screening phytochimique

Les différentes familles chimiques présentes dans les extraits des deux plantes étudiées ont été recherchées en utilisant les méthodes classiques [8].

L’étude phytochimique de ces deux extraits révèle majoritairement la présence des alcaloïdes, des tanins et des saponines dans le Chenopodium ambrosioides alors que seuls les alcaloïdes dans le Erigeron floribundus sont détectés (Tableau 4).

Analyse statistique L’analyse statistique des résultats a été réalisée par comparaison de chaque lot d’animaux traités aux lots témoins en utilisant le test t de student Fisher avec P<0,05 [5].

Résultats Étude ethnobotanique L’enquête ethnobotanique a été réalisée auprès des pratiquants de la médecine traditionnelle dans la partie sud de Brazzaville (Tableau 1). Étude bibliographique L’enquête bibliographique a été réalisée sur la base des plantes à potentialités antitussives citées par les pratiquants ou non (Tableau 2). Étude pharmacologique Étude de la toxicité des extraits Les doses de 200, 400 et 800 mg/kg des deux extraits ne modifient pas l’état général des animaux par rapport aux témoins. Les animaux sont en état de vigilance et sensibles aux stimuli extérieurs, alors que les doses de 1600 et 3200 mg/kg entrainent somnolence et fatigue par rapport aux témoins. Les doses de 100, 200 et 300 mg/kg de E.f. et 200, 400 et 800 mg/kg de C.a. ont été choisies pour les études pharmacologiques. Etant donné que la dose de 100 mg/kg de Erigeron floribundus nous a donné des résultats non significatifs, nous avons opté de commencer les tests à 200 mg/kg pour le Chenopodium afin de pouvoir comparer ces deux plantes.

Discussion L’étude ethnobotanique nous a permis de confirmer l’utilisation des plantes de la flore congolaise dans le traitement de la toux. Ces plantes recensées confirment les données bibliographiques. Les plantes qui ont fait l’objet de notre étude ont été les plus citées chez les pratiquants et n’ayant pas fait l’objet d’une étude de l’activité antitussive au préalable. L’inhalation d’une solution aqueuse d’acide citrique cause l’irritation des chémorécepteurs des voies aériennes des cobayes qui induit la toux [1]. De cette étude, il ressort que les extraits aqueux des feuilles des deux plantes diminuent significativement les quintes de toux induites par l’acide citrique. Et la dose de 200 mg/ kg, de l’extrait de Chenopodium ambrosioides est aussi efficace que la codéine qui a été utilisée comme molécule de référence à la dose de 10 mg/kg. Par contre, le Erigeron floribundus n’est efficace qu’à partir de 300 mg/kg. De ces deux extraits aqueux le Chenopodium ambrosioides L. serait plus efficace que l’extrait de Erigeron floribundus kunth. En présence de la codéine seule, les quintes de toux diminuent par rapport au témoin, cet effet s’inversant en association avec la naloxone. La naloxone n’inhibe pas les effets antitussifs des deux extraits testés. La naloxone étant un antagoniste pur, spécifique et compétitif des morphiniques, ces extraits n’agissent donc pas via les récepteurs morphiniques. L’action de ces extraits pourrait être donc due à la stimulation des récepteurs muscariniques [1]. L’étude phytochimique de ces deux extraits révèle majoritairement la présence d’alcaloïdes, de saponines et de tanins. L’activité antitussive de ces extraits pourrait être liée à la présence de ces métabolites secondaires, notamment les alcaloïdes et les saponosides. En effet, la codéine qui est utilisée comme produit de référence dans cette étude, est un alcaloïde à activité antitussive. De même, les plantes à saponosides sont traditionnellement utilisées pour leurs propriétés antitussives et/ou expectorantes

Étude de l’activité antitussive et mécanisme d’action Les extraits de Chenopodium ambrosioides et de Erigeron floribundus ont montré un effet antitussif dose-dépendant très significatif (*p<0,05, ** p<0,01, *** p<0,001) aux doses de 200, 400, 800 mg/kg pour Chenopodium ambro-

Conclusion L’enquête sur le terrain confirme l’utilisation de ces deux plantes comme antitussive. L’extrait aqueux de Chenopodium

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Tableau 1 Résultat de l’étude éthnobotanique. Genre et espèce

Famille

Noms vernaculaires

Organe utilisé

Forme d’utilisation

Allium sativum Catharan thus roseus Chenopo dium ambrosioides

Lilliaceae Apocinaceae

Graine Feuille

Trituration Toux Non rapporté Toux

Non rapportée 1 Non rapportée 2

Feuille

Décoction

1 c à s × 3/j

Tige

Mâcher

Toux, fièvre, épilepsie, vermifuge, hémiplégie Toux

Rubiaceae

ail pervenche de Madagascar lari : lukaya lua kuyu akwa : awoulouwoussou lari: nsagavulu wa mpembe lari : muwala

Racine

Décoction

Non rapportée 4

Poaceae

citronnelle

Décoction

Caryophylla ceae Asteraceae

lari:ngouriaka

Feuille/ racine Feuille

Toux, bronchite, grippe, palpitation cardiaque Toux

Décoction

feuille

Infusion

Ecorce

Décoction

Costus lucanusia nus J. Braun Crossop teryx febrifuga (G.Dom) Benth.

Cymbopo gon citratus Drymaria cordifolia Willd Erigeron floribundus Kunth.

Hymenocar dia acida Hymenocar dia ulmoïdes Manihot utilissima Maprounea africana Myrianthus arboreus P. Beauv Nauclea latifolia

Chenoponaceae

Costaceae

lari: fumu dia bakuyu; vili: ndohunsitu bakoukouya : foumoudia nzabi :moupopodi guéré :gotouba kikongo :foumou dia bakouyou Euphorbiaceae lari: mouhété

Utilisation médicinale

Posologie

Nombre de citation

7

Non rapportée 1

Non rapportée 3

Toux, Non rapportée 1 bronchite Fièvre 1 c à s × 3/j 8 toux, céphalée, épilepsie; tuberculose, asthme

Euphorbiaceae lari: nsagani ; vili: mboka Euphorbiaceae ntôba Ya yâta Malvaceae lari: munsagula

Feuille

Décoction

Feuille Feuille

Trituration Mâcher

Hémorroïde, diarrhée Toux, infection respiratoire Toux Toux

100 ml/j

1

Urticaceae

lari: nsogoti

Racine

Trituration

Toux

Non rapportée 2

Rubiaceae

lari: tsienga; vili: ntumbi

Racine

Solanaceae

aubergine violette

Feuille

Toux, asthme, dysurie, blennorragie Toux

1 c à café ×3/j 2

Solanum melangena Trema orientalis (L.)Blume

Décoction dans le vin de palme Décoction

Ulmaceae

bémbé:yayaka

Feuille

Décoction

Vitex madiensis

Verbenaceae

lari: mfilu

Feuille

Décoction

toux, hypotenseur, angine affection respiratoires

Non rapportée 4 Non rapportée 2 Non rapportée 1

Non rapportée 2 Non rapportée 1

100 ml × 3/j

4

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Tableau 2 Résultat de l’étude bibliographique.

1 2

3 4 5 6 7

8

9

10 11 12 13

14

15 16

Genre et espèce

Famille

Noms vernaculaires

Organe utilisé

Forme Utilisation d’utilisation médicinale

Posologie

Réf

Abrus precatorius Allanblackia floribunda

Fabaceae

lari:nguienguie

Feuille

Décoction

6

Clusiaceae

loali:mugnognon ; téké:mugnoye

Feuille Décoction ouécorce

Lilliaceae

Ail

Graine

Trituration

Toux, asthme, bronchite, affection pulmonaire, mal de ventre Toux

Non rapportée Non rapportée

Annonaceae

lari: corossol

Feuille

Décoction

Toux

Feuille

Non rapporté Toux

Feuille

Décoction

Toux

Feuille

Décoction

Toux vermifuge, asthme, rougeole, rhumatisme, diabète, dermatose Toux Non rapportée

Allium sativum Annona muricata Catharantus roseus Chaetocarpus africanus Pax Chenopodium ambrosioides

Costus lucanusianus J. Braun et K.Schum Crossopteryx febrifuga (G.Dom) Benth. Cymbopogon citratus Cymbopogon densiflorus Cyperus articulatus L. Desmodium velutinum (Willd) D C Discogly prem caloneura

Apocinaceae Pervenche de Madagascar Euphorbialari:lubundu ceae Chenopona- lari : lukaya lua ceae kuyu

Toux

Non rapportée Non rapportée Non rapportée Non rapportée 1 c à s × 3/j

6

4 6,9,11 6 6,12 4-6

Costaceae

lari: nsagavulu wa mpembe

Tige

Mâcher

Rubiaceae

lari : muwala

Racine

Décoction

Toux, bronchite, grippe, palpitation cardiaque

Non rapportée

6,11,15

Poaceae

Citronnelle

Feuille

Décoction

Toux

6

Poaceae

lari: lwangu

Feuille

Décoction

Toux, bronchite

Cyperaceae

Lali : ntsoa-ntsaka ; Racine mbossi:litsatsao laadi:lunamanama, Feuille

Décoction Décoction

Toux, asthme, tuberculose Toux

Non rapportée Non rapportée Non rapportée Non rapportée

yaa: buku

Ecorce

Décoction

Feuille

Décoction

Feuille

Infusion

FabaceaeFaboideau Euphorbiaceae

Drymaria Caryophylla- lari:ngouriaka cordata (Wild) ceae Erigeron Asteraceae lari: fumu dia floribundus bakuyu; vili : kunth. ndohunsitu

Toux, convulsio, douleurs gastrointestinal toux, bronchite Inflam- mation, analgésique, gastralgie, dermatose, toux, céphalée, épilepsie; tuberculose, asthme

6,11,13,14

6 6,14 6,12

Non rapportée

6

Non rapportée 1c à s × 3/j

16 4-6

(Suite page suivante)

6

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Tableau 2 (suite)

17

18 19 20

21

22 23 24

25 26

27

Genre et espèce

Famille

Eucalyptus citriodora Hook. Eupatorium africanum Hymeno cardia acida Hymeno cardia ulmoïdes Maesobotrya barteri (Baill.) Hutch. Manihot utilissima Ocimum basilum Ocimum gratissimun

Myrtaceae

Passiflora foetida L. Ricinoden dron heudelotii (Baill.) Pierre ex Heckel Trema orientalis

Noms vernaculaires Organe utilisé

Forme d’utilisation

Feuille Décoction etrameau

Utilisation médicinale

Posologie

Réf

Toux

Non rapportée

17

Asteraceae

laali: nkasamakanga Racine

Décoction

Euphorbiaceae Euphorbia ceae

lari: mouhété

Ecorce

Décoction

lari: nsagani ; vili: mboka

Feuille

Décoction

Toux, infection respiratoire

Non rapportée

6

Feuille

Macération

Toux

Non rapportée

6,14,15

Euphorbiaceae Labiaceae

ladi: tchinanansasaka ; bembé:muhanza ntôba Ya yâta

Feuille

Macération

Toux

6

Lari : mazulu

Feuille

Décoction

Toux

Labiaceae

lari:masusu

Non rapporté Toux, bronchite, rhume

Passifloraceae Euphorbiaceae

bimfi

Non rapportée Tige feuillée Ecorce

Non rapportée Non rapportée Non rapportée

Ulmaceae

lari:yayaka

Phyllanthaceae

vili:musangala; koyo:musongo

Feuille

Diarrhée, toux

Non rapportée Hémorroïde, diarrhée 100 ml/j

Décoction

toux

Décoction

Toux, blennorragie, antipoison, dysménorrhée

Décoction

Toux, hypotension angine

6,14 6

4 6

Non rapportée Non rapportée

6,11

Non rapportée

15

6,15

Tableau 3 Effets des extraits du Chenopodium ambrosioides et de Erigeron floribundus sur le nombre de quinte induite par l’acide citrique et de l’influence de la naloxone (Narcan®) sur les effets des extraits. Produits

Doses (mg/kg)

Quintes de toux

Eau distillée Eau distillée avec la naloxone Codéine codéine avec la naloxone Chenopodium ambrosioides

0,5 ml/100g

3,6±0,59 3±0,14 0,4±0,25** 3±0,10** 0,6±0,49*** 0,2±0,09*** 0,00±0,00*** 0.5±0,09*** 2,8±1,02(NS) 2±0,63* 0,4±0,18*** 2.2±0,10***

Chenopodium ambrosioides avec la naloxone Erigeron floribundus

Erigeron floribundus avec la naloxone NS : non significative ;*p<0,05, ** p<0,01, *** p<0,001.

10 200 400 800 200 100 200 300 200

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Tableau 4 Screening chimique de Chenopodium ambrosioides (L.) et de Erigeron floribundus Kunth. Le screening phytochimique de ces deux plantes révèle la présence des alcaloïdes, des flavonoïdes, des stérols, des tanins et des saponines. Mais le Chenopodium ambrosioides révèle majoritairement la présence des alcaloïdes, des tanins et des saponines alors que seuls les alcaloïdes sont majoritaires dans le Erigeron floribundus. Famille

Chenopodium Erigeron ambrosioides floribundus

Alcaloïdes Flavonoïdes Quinones libres Stérols Anthraquinones Anthocyanes Hétérosides cardiotoniques Tanins Saponines

+++ + + + + +++ +++

+++ + + + +

+: test positif, -: test négatif, +++: Très abondant.

ambrosioides et de Erigeron floribundus kunth. ne sont pas toxiques aux doses utilisées. Ces extraits ont un effet antitussif significatif dose-dépendant. Le screening phytochimique de ces deux plantes révèle la présence des alcaloïdes, des flavonoïdes, des stérols, des tanins et des saponines. Mais le Chenopodium ambrosioides révèle majoritairement la présence des alcaloïdes, des tanins et des saponines alors que seuls les alcaloïdes sont majoritaires dans le Erigeron floribundus. Une étude pharmacologique est à faire pour mettre en évidence la relation entre les métabolites secondaires et l’effet observé. Liens d’intérêts : les auteurs déclarent ne pas avoir de liens d’intérêts

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